实验八动物细胞融合.ppt

实验八 动物细胞融合;一、实验目的;二、实验原理;;人工诱导细胞融合;1、病毒诱导融合;2、化学诱导融合;3、电脉冲诱导融合;;;4、激光诱导融合; 聚乙二醇（polyethyleneglycol,PEG）法的原理：PEG分子能改变各类细胞的膜结构，使两细胞接触点处质膜的脂类分子发生疏散和重组，由于两细胞接口处双分子层质膜的相互亲合以及彼此的表面张力作用，使细胞发生融合。;;动物细胞融合影响因素;④细胞融合过程中，通常耗氧量较大，缺氧时经常不融合。空气中含氧量大于20％时有一定融合率，但有些细胞在无氧条件也可融合。 ⑤有些细胞融合时需要Ca2+，否则不融合，细胞蛋白质亦发生变化。 实验表明Sr2+、Ba2+、Mg2+、Mn2+等离子可代替Ca2+，但有效浓度较Ca2+大的多。融合时最适合的离子强度一般为0.1mol/L。 ⑥最适合的pH为7.4-7.8之间，在此范围之外，融合率均较低。 ;;三、细胞融合的应用;四、实验材料、设备;PEG 融合实验步骤; 1.在显微镜下观察细胞融合情况，可看到不同融合状态的细胞：两细胞的细胞膜间相互接触、粘连；接触部位的细胞膜崩解，两细胞间的细胞质相通，形成细胞质通道；通道扩大，两个细胞连成一体；细胞合并完成，形成一个含有两个或多个核的圆形细胞。 ;[注意事项];;;;作业