酶工程复习材料.docxVIP

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  • 2022-10-22 发布于北京
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1。 酶生物合成的模式有哪些?哪一种模式较为适宜生产的需要?对待其他的合成模式,应如何调整发酵的条件以使其更为趋近于最佳的模式? 酶生物合成的模式 ·同步合成型 ·连续合成型 ·中期合成型 ·滞后合成型 同步合成型 同步合成型 概念:酶的合成与细胞生长同步进行。当细胞进入对数生长久,酶大量产生,细胞生长进入稳定期后,酶的合成随之停止。 特点:属于这种类型的酶,其生物合成能够诱导,但不受分解代谢物阻遏和产物阻遏作用. 连续合成型 连续合成型 概念:酶的合成伴随着细胞的生长而开头,但在细胞生长进入平衡之后,酶还能够连续合成较长的一段时间。 中期合成型特点:这种类型的酶可受诱导但不受分解代谢物阻遏和产物阻遏,其对应的 mRNA 是相当稳定的. 中期合成型 概念:酶的合成在细胞生长一段时间以后开头,而在细胞进入平衡期后,酶的合成也随着停止。 特点:酶的合成受到反馈阻遏,而且其所对应的mRNA 是不稳定的。 滞后合成型 滞后合成型 概念:只有当细胞生长进入平衡期后,酶才开头合成并大量积累。特点:酶的合成受到分解代谢物阻遏作用. 在酶工程生产中为了提升酶的生产率,延长酶的发酵生产周期,酶最抱负的生物合成模 式应为部分生长偶联型(连续合成型),由于这类酶在发酵经过中没有明显的生长久和产酶区的区分,随细胞生长即有酶的产生,直到细胞生长进入平衡期之后酶还能够合成。对待其他型的酶,要提升酶产率,能够再细胞选育上,工艺条件等方面加以条件控制.对待同步合成 型的酶,能够采纳适当的生产工艺,如降低发酵温度以尽量提升其对应的 mRNA 的稳定性; 对待滞后合成型的酶,在发酵经过中应设法尽量削减甚至借出分解代谢物阻遏,使酶的合成 提早开头, 控制葡萄糖等易利用碳源, 添加肯定量的 cAMP;对待中期合成型的酶,则要在提升 mRNA 稳定性和解除阻遏两方面进行。控制末端产物浓度,添加末端产物类似物 2. 试以基因调整控制理论说明酶生物合成的分解代谢物阻遏作用、诱导作用及反馈阻遏作用的原理。 基因调整控制理论—--—-——操纵子学说 分解代谢物阻遏作用 分解代谢物阻遏作用 是指简单利用的碳源阻遏某些酶(主要是诱导酶)生物合成的现象 酶生物合成的诱导作用 酶生物合成的诱导作用 是指加进某种物质,使酶的生物合成开头或加速进行的经过 酶合成的反馈阻遏作用 酶合成的反馈阻遏作用 是指酶催化作用的产物或代谢途径的末端产物使该酶的合成受阻的经过 3。 何为酶电极、酶标免疫测定? 酶标免疫测定 酶标免疫测定 酶电极是指在放射免疫测定的基础上进展起来的一种分析方式,它是将酶作为标记物质,使之和抗 原(或抗体)结合形成酶与抗原(或抗体)复合物,然后再依据待测抗体(或抗原)与复合物专 一且定量的结合关系,经过测定与待测抗体(或抗原)结合的酶的活力,从而计算出待测抗体(或抗原)的量. 酶电极 是最早问世的生物传感器,它是把测定无机离子或低分子量气体的电化学器体(如离子选择性电极或气敏电极)与酶固定化技术相结合而产生的传感器,使原来仅有测量物理量功能的电极具备了测量生物化学量的功能,它在生物试样化学成分的检测方面具有良好的选择性和 较强的特异性。 4. 试以米氏方程说明酶法分析、酶活测定的原理. 酶活力测定(Enzyme Assay) 分析对象—- 酶 一般常测定酶促反应的初速度以确定酶活力. 酶单位:1961 年,国际生化联合会酶委员会建议,一个酶单位为在确定的最适反应条件下, 每分钟催化 1 цml 分子底物变化所需要的酶量. 测定原理: 酶法分析(Enzyme Analysis ) 分析工具—- 酶(酶免分析、酶电极) 原理: 米氏方程: 当 s 〈 km 时,即反应体系中底物浓度较低,酶量足或过量时,v ≈vm/km。[s ] ,即测定的酶活(反应速度)与体系中的底物浓度成正比,具有线性的比例关系。 6。 何为酶工程、抗体酶、半抗原、酶的专一性,酶的分类. 酶工程 酶工程 抗体酶即利用酶的催化作用,在肯定的生物反应器中,将相应的原料转化成所需的产品.酶工程是现 代酶学理论与化工技术的交叉技术,它的应用主要集中于食品工业、轻工业和医药工业等领域. 抗体酶 半抗原经过转变抗体中与抗原结合的微环境,并在适当部位插入催化基团,所产生的具有催化活性的抗体. 半抗原 酶的专一性有些小分子化合物(如药物)因其结构简单,本身不是抗原,不能免疫动物,但是当它和蛋白质载体结合后就能够成为抗原,免疫动物因之产生的抗体能够与小分子化合物本身起抗原 抗体反应,这种小分子化合物一般称之为半抗原。 酶的专一性 是指酶对催化反应和反应物有严格的选择性。被作用的反应物通常叫做底物,酶往往只能催化一种或一类反应,作用于一种或一类物质,一般催化剂没有这样的选择性。 酶作用专一性的类型 1。 立体异构专一

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