平面色谱法课件.pptxVIP

平面色谱法课件;一、平面色谱法得特点;二、平面色谱得主要技术参数;1、平面色谱定性参数及相平衡参数关系;讨论 Rf与K有关,即与组分性质、平面板与展开剂得性质有关 K↑大,Rf↓小 色谱条件一定,Rf只与组分性质有关,就是平面色谱基本定性参数,说明组分保留行为 Rf范围:0 Rf 1 Rf = 0、2~0、8(常用);0、3~0、5(最佳);相对比移值Rs ;2、平面色谱分离评价参数;TLC分离度与比移值得关系;3、平面色谱板效参数;三、平面色谱法操作流程图;一、概述;大家学习辛苦了，还是要坚持;二、吸附薄层色谱材料;1、硅胶:最常用得吸附剂,SiO2·XH2O;1)物质极性↑,吸附能力↑ →强极性吸附中心,不易洗脱 2)吸水→占用活性位点→失活 105~110OC烘干30min(活化),吸附力最大 500OC烘干(不可逆失水)→无吸附力;碱性(pH 9~10): 分离碱性及中性化合物。如生物碱等。 酸性(pH 4~5): 用于分离酸性中性物质。如酸性色素、氨基酸等。 中性(pH 7、5): 用途最广,适于分析酸性碱性与中性物质,如生物碱、挥发油、甾体等。;吸附得原因——氢键。 吸附强弱: 五级,级数高,含水量大,吸附力弱; 常用得就是聚己内酰胺,商名为锦纶、尼龙-6、卡普隆等。 吸附得原因——氢键 聚酰胺分子内存在着许多酰胺基,可与酚、酸、醌等形成氢键;;;含粘结剂固定相: 硅胶G——含13%~15%煅石膏 制备硅胶G——含30%煅石膏 氧化铝G——含9%煅石膏 不含粘结剂固定相:硅胶H;2)有机粘结剂: 羧甲基纤维素钠(CMC) 0、8%CMC溶液配匀浆涂铺得薄层板强度高,色谱分离性能好 注意:不适合浓硫酸显色,易霉变降解;作用:适当波长激发光照射下可以产生均匀得荧光背景,清晰显示化合物得暗斑 短波荧光指示剂: 254nm 锰激活得硅酸锌;钠荧光素,阴极绿 长波荧光指示剂: 365nm 银激活得硫化锌、硫化镉;彩蓝; 硅胶H——不含粘合剂 硅胶G——硅胶与煅石膏混合而成 硅胶HF254——不含粘结剂,含荧光指示剂 254 nm呈现强绿色荧光背景 硅胶GF254——同时含粘结剂与荧光指示剂 254 nm呈现强绿色荧光背景 硅胶HF254+365——不含粘结剂,含荧光剂 254 nm与356 nm呈现荧光背景; 被分离物质得极性 展开剂得极性 吸附剂得活度;1、被分离物质得极性; 石油醚 环己烷 二硫化碳 三氯乙烷 苯 甲苯 二氯甲烷 氯仿 乙醚 乙酸 乙酯 丙酮 正丁醇 乙醇 甲醇 吡啶 酸;极性化合物——选用吸附活性小得(活度级别大得)薄层板,极性大得强洗脱剂展开 非极性化合物——选用吸附活性大得(活度级别小得)薄层板,极性小得强洗脱剂展开;4、TLC色谱条件选择原则;四、薄层色谱操作过程;四、薄层色谱操作过程; 薄层放置110℃烘30min,干燥器中备用 吸附剂活性越高,活性级别越低; 最好二级或三级 不可将刚涂布好得薄层板立即烘烤活化;3、点样;点样原点应小而圆,距板边缘2cm 多次点样(每次挥干后),防止边缘效应 点样量勿超载,防止拖尾 点样勿伤及薄层表面;4、展开;5、定位;——日光,紫外光,显色剂显示 ——测出Rf值 相同条件下展开,与已知标准物质对照进行定性鉴别。;7、定量分析;1、薄层扫描法检测茶碱中毒者血清中茶碱浓度 2、TLC同时测定10种精神安定药物血药浓度 3、异烟肼中毒快速检验 4、尿液中利福平得测定 5、薄层扫描法测定血浆中得度冷丁;2010版药典(二部)采用TLC得品种数量,共435个;2005年版收载薄层色谱定性鉴别1507项 2010年版新增薄层色谱定性鉴别2494项