脂类测定PPT课件.pptVIP

封闭非LDL脂蛋白与酶的反应，从而使LDL与酶反应 使非LDL脂蛋白与 LDL分二步水解，消除非LDL脂蛋白 3. 直接测定法： * 临床意义： 动脉粥样硬化 主要脂类危险因素 * （四）脂蛋白（a)测定 一般用免疫化学法 临床意义： 肝脏合成。 一类独立的脂蛋白。 与动脉粥样硬化正相关。 * 五、血清载脂蛋白测定 一般用免疫化学法 临床意义： ApoAI是HDL的主要蛋白 ApoB是LDL的主要蛋白 冠心病、肾病综合症、糖尿病都有 A下降-----B升高 * 一、血清总蛋白测定 两个假设： 都是单纯蛋白； 所有蛋白与化学试剂发生相同反应。 * 1.凯氏定氮法 蛋白+强酸消化---铵盐+碱---氨----酸滴定，测定总氮量---×6.25 * 2. 双缩脲法 * + -HOH 甘氨酰甘氨酸 肽键 * * -CO-NH-碱性下与Cu2+络合成紫色化合物—与蛋白量成正比。 简单、准确、重复性好 * 3 酚试剂法（Lowry法） 酪氨酸残基和色氨酸残基与酚试剂的磷钨酸、磷钼酸------蓝色化合物 加上Cu2+,结合双缩脲法，提高灵敏度 适于测单一蛋白，且适用于蛋白含量较少的样品 * 4 比浊法 酸性试剂+蛋白质--------沉淀 5 染料结合法 酸性条件下，蛋白质------NH3+酪，与染料中阴离子产生颜色反应。 氨基黑、考马斯亮兰 * 6 紫外分光光度法 色氨酸、酪氨酸 在280nm有吸收峰 保持蛋白活性 7 折光测定法 溶于溶液中的固体可增加它的光折射率 固定波长、固定温度下，光折射率与蛋白浓度成正比 * 血清总蛋白-------临床意义： 升高：多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症等。 降低：白蛋白合成减少，或蛋白丢失 * 二、血清白蛋白测定 1. 染料结合法 白蛋白与染料结合，球蛋白很少与染料结合 溴甲酚绿，溴甲酚紫 白蛋白（pH4.2, +) +BCG-------蓝绿色化合物------OD与白蛋白浓度成正比 * 2. 盐析法 球蛋白先沉淀 3. 电泳法 4. 2免疫化学法 抗原抗体反应；抗体过量 * 临床意义 合成减少 吸收减少 丢失过多 * 七、脑脊液蛋白质测定 脉络膜的毛细血管壁超滤形成，及少量中枢神经系统合成 浊度法 染料结合法：考马斯亮兰，邻苯三酚红钼络合显色法。 * 临床意义： 神经系统疾病 血脑屏障通透性增加；血管性脑水肿，细胞含量过多，神经细胞坏死等 * 三、血清球蛋白测定 球蛋白中色氨酸占2%，而白蛋中仅0.2% 乙酰色氨酸+乙醛酸反应------紫色 * 四、血清纤维蛋白原测定 1. 凝块测定法：加凝血酶—血块---挑出—双缩脲---比色 2. 比浊法：13.3%硫酸铵 3. 盐析 4. 免疫化学法： * 临床意义： 升高：急性时相反应蛋白。 降低：营养不良，严重肝损伤， 血管内凝血，先天缺乏 * * * . - * k * . 第十一章 血脂及血浆脂蛋白检验 目标： 载脂蛋白及脂蛋白受体 血浆脂蛋白的代谢 血脂、脂蛋白及载脂蛋白的测定 血浆脂蛋白异常与动脉粥样硬化有密切关系 富含甘油三脂的脂蛋白是冠心病的独立危险因子 * 第一节 概述 一、血脂及血浆脂蛋白 二、脂蛋白代谢紊乱 * 一、血脂及血浆脂蛋白 甘油三脂：能量代谢 胆固醇：脂膜、激素和胆汁酸 磷脂、糖脂、类固醇 * 电泳法 超速离心法 CM、VLDL、LDL、HDL ? ? CM ? 前? ? （一）血浆脂蛋白的分类： （病理条件: LDL 脂蛋白a * 疏水性较强的TG及胆固醇酯位于内核。 具极性及非极性基团的载脂蛋白、磷脂、游离胆固醇，以单分子层借其非极性疏水基团与内部疏水链相联系，极性基团朝外。 （二）血浆脂蛋白的组成与结构 * CM VLDL LDL HDL 密度 ＜0.95 0.95~1.006 1.006~1.063 1.063~1.210 组 成 脂类 含TG最多， 80~90% 含TG 50~70% 含胆固醇及其酯最多，40~50% 含脂类50% 蛋白质 最少, 1% 5~10% 20~25% 最多，约50% 载脂蛋白组成 apoB48、E AⅠ、AⅡ AⅣ、CⅠ CⅡ、CⅢ apoB100、CⅠ、CⅡ CⅢ、 E apoB100 apo AⅠ、 AⅡ 血 浆 脂 蛋 白 的 组 成 特 点 * （三）载脂蛋白 与脂质亲和作用使脂质溶于水性介质， 利于运输胆固醇和甘油三酯 2. 作为脂蛋白外壳结构成分，与外面信息 联系，如作为脂蛋白与受体的连接物 3. 激活某些与脂蛋白代谢有关的酶 * 种类（18种） apo A: AⅠ、AⅡ、AⅣ apo B