菌种保藏的原理和方法.pptxVIP

会计学;04 菌种保藏的原理和方法;斜面保藏法和穿刺保藏法 沙土管干燥保藏法 真空冷冻干燥保藏法 液氮保藏法 悬液保藏法 低温保藏法 ;第3页/共15页;第4页/共15页;（1）斜面保藏法：是一种短期、过渡的保藏法，用新鲜斜面接种后，置最适条件下培养到菌体或孢子生长丰满后，放在4℃冰箱保存（过低，会结冰；太高，达不到保存目的）。保存期一般为3~6月。 注意点： （1）水分：用牛皮纸避免水分蒸发，或用橡皮塞 （2）培养基：专门设计的培养基，营养相对不太丰富 （3）微生物状态：孢子或芽孢长好后，再保藏，不易退化 （4）温度：4℃冰箱保存（过低，会结冰；太高，达不到保存目的） （2）穿刺保藏法： （略） ;2.沙土管干燥保藏法（略） ;5.悬液保藏法（略） ;保藏斜面 活化斜面;;国内举例： ▲中国微生物菌种保藏委员会（ CCCCM, China Committee for Culture Collection of Microorganisms）;国外举例： ▲ ATCC（美国菌种保藏所 / 美国典型菌种保藏中心，American Type Culture Collection, Rockville, Maryland, USA） ATCC创立于1899年，是著名的微生物菌种保藏中心。它是一个实力很强的私立的非盈利性质的机构，现已成为世界上培养物最多的保藏中心，是国际受托保存专利菌种的单位，是国际认可的保藏机构。目前仅采用两种最有效的保藏方法，即保藏期一般达5~15年的冷冻干燥保藏法和保藏期一般达20年以上的液氮保藏法，两者结合可达到既可最大限度减少不必要的传代次数，避免菌种退化，又不影响随时分发给全球用户，效果甚佳。 而我国菌种保藏一般采用三种方法：斜面定期移植法；液体石蜡封藏法；冷冻干燥保藏法。对放线菌还另有沙土法，对丝状真菌另加麸皮法保藏。（周德庆教材：我国CCCCM的规模目前为亚洲第一（有1.4万株各种微生物），现在采用3种保藏法（斜面传代法、冷冻干燥保藏法和液氮保藏法）进行保藏。）; 两种保藏法结合使用的原理是：当菌种保藏单位收到合适的纯种时，先将原种制成若干管液氮菌种作为长期保藏用菌种，然后再制一批冷冻保藏菌种作为用户分发用。约经5年后，假定第一代（原种）的冷冻干燥保藏菌种已分发完毕，就再打开一支液氮保藏原种制备大量冷冻保藏菌种，这样下去，至少在20年内，凡获得该菌种的用户，至多只是原种的第二代，从而保证了保藏菌种与分发菌种的高质量标准。;▲ I FO（发酵研究所，日本大阪. Institute for Fermentation, Osaka, Japan ） ▲ NCTC（国家典型菌种保藏中心,英国伦敦. National Collection of Type Culture. London, United Kingdom） ▲ NRRL（Northern Utilization Research and Development Division, U.S Department of Agriculture. Peoria, U.S.A. 美国农业部、北方开发利用研究部，美国皮奥里亚市） 与ATCC同为美国有名的菌种保藏机构，收藏的微生物标本近2万株，以酵母最多，近1万株。 ▲ CBS（荷兰的霉菌中心保藏所, Centraalbureau Voor Schimmel Cultures, Baarn, holand）是世界上最著名的真菌保藏机构，保藏的各种菌株近2万种，其中霉菌达12000种以上，酵母3500株，另有少量细菌和放线菌。 ▲ ARS (美国农业部农业研究服务部, Agricultural Research Service, Northern Utilization Research and Development);√1、微生物菌种保藏的基本原则是什么？常用的有哪些方法？以放线菌为例，详细说明此菌种保藏的基本操作过程。 √ 2、比较大的菌种保藏机构有哪些？ √ 3、常用的菌种保藏方法有斜面冷冻法、菌丝速冻法、真空冷冻干燥保藏法、液氮超低温保藏法等，比较大的菌种保藏机构有美国典型菌种保藏中心（ATCC）、日本大阪发酵研究所（IFO）等。