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3. 同份异构体鉴别 己二酮(调配白脱、乳酪、奶油、焦糖、菠萝蜜、荔枝等，食用香精）异构体鉴别 O O H3C-C-CH2-CH2- C-CH3 λmax 270nm O O H3C-CH2-C--C- CH2 -CH3 λmax 400nm 第五十一页，共一百一十四页，2022年，8月28日 4.纯度的检查 3 2 2 1 1 甲醇被苯污染 容器塞子对乙醇污染 1－合成维生素A2 1－甲醇 1－乙醇 2－天然维生素A2 2－被苯污染的甲醇 2－乙醇被软木塞污染 3－乙醇被橡皮塞污染 第五十二页，共一百一十四页，2022年，8月28日 定量分析 依据：Beer-Lambert定律 A=εbc 一、一般定量分析法 1、单一组分的测定 试样中只一种组分，or在待测组分波长最大处λmax无其他共存物质吸收，多采用标准曲线法，在λmax处定量。A=0.15～0.8，最佳0.34 第五十三页，共一百一十四页，2022年，8月28日 ２、多组分的测定 a.若各种吸光物质吸收曲线互不重叠，则可按单一组分的测定方法。 第五十四页，共一百一十四页，2022年，8月28日 b. 若各种吸光物质吸收曲线相互重叠，则可根据加和性，通过解联立方程测定。 Aλ1A+B = ελ1AbcA + ελ1BbcB Aλ2A+B = ελ2AbcA + ελ2BbcB 解方程可求cA，cB。 当溶液中有多个组分时也可用上述方法。 第五十五页，共一百一十四页，2022年，8月28日 二、双波长分光光度法 此法适合于浑浊试样及吸收光谱相互重叠的混合物。 λ1 λ2 Aλ1 = H + ελ1BbcB Aλ2 = H + ελ2BbcB 第五十六页，共一百一十四页，2022年，8月28日 应用举例 蛋白酶的测定： 在一定T、pH下，蛋白酶作用于底物酪蛋白，则酪蛋白水解成酪氨酸，酪氨酸和福林试剂(Na2WO4.2H2O,Na2MoO4.2H2O)反应显色。酶活力 高，则酪氨酸 多，则颜色 深，在680nm下测定。 酶液提取：大豆粉，用pH7.5缓冲液溶解 定容 过滤 滤液定容。 第五十七页，共一百一十四页，2022年，8月28日 A A B λ1 λ2 c 第五十八页，共一百一十四页，2022年，8月28日 红外光谱法 Infrared absorption spectrographic analysis 第五十九页，共一百一十四页，2022年，8月28日 红外区按波长分成三个波区: A.近红外区 0.76～2.5um (760 nm～2500 nm) C-H,N-H,O-H振动能级跃迁所产生的吸收或能量较低的电子能级的跃迁发生在此波区。 主要用于蛋白质、脂肪、水分、淀粉、纤维、半纤维、木质素等的定性定量分析。 B.中红外区 2.5～25um 绝大部分的有机化合物和许多无机化合物的化学键的振动基频都出现在此区,是红外分析最重要的区域。此区又分二个区: 官能团区:2.5～7.7um 反映分子中特征基团的振动,受分子骨架影响小,基团的波数位置较固定。鉴别基团结构。 指纹区:7.7～25um 反映分子结构的细微变化,每一种化合物在该区的谱带位置、形状、强度都不一样,相当于人的指纹,故称指纹区。鉴别分子结构细微变化及异构体。 C.远红外区 25～1000um 纯转动能级的跃迁。主要是鉴别气体分子纯转动能级的跃迁及卤素、硫等原子的伸缩振动引起。 第六十页，共一百一十四页，2022年，8月28日 定性分析 1.利用已知物与未知物图谱比较对照鉴定。 ?????