微生物的遗传变异和育种.pptVIP

突变育种的基本环节 美国加利福尼亚大学的Ames教授发明 化学药剂对细菌的诱变率与其对动物的致癌性成正比。95%以上的致癌物质对微生物有诱变作用，而非致癌物质对微生物没有诱变作用； 意义：通过检测某种待测物对微生物的诱变能力，间接判断其致癌能力。 Ames试验 — 测定潜在化学治癌物 Ames试验原理 利用鼠伤寒沙门氏菌的组氨酸营养缺陷型菌株发生 的回复突变性，检测待测物的致突变性。 供试的几个菌株中，均含有控制组氨酸合成的基因。 当培养基中不含组氨酸时它们不能生长。但是，如受到 某种致突变物的刺激，发生突变而回复成野生菌株后， 培养基中即使不含有组氨酸时，该菌也能生长。 野生型与缺陷型的关系： 正向突变 野生型 his+ 缺陷型 his- 回复突变 1、某突变菌株在基本培养基上无法生长，而在添加了0.1%碱水解酵母核酸后，该菌株能生长。请设计一实验方案以进一步确定该菌株的生长必需物。 2、什么叫做营养缺陷型菌株?在实验室中如何从原养型菌株获得营养缺陷型菌株?请设计一个具体实验方案。 3、怎样用实验证明突变是自发产生的，而不是受环境诱导产生的？ 作业题  三、基因重组和杂交育种 基因重组(遗传重组,简称重组）: 两个不同性状个体内的遗传基因转移到一起，经过遗传分子的重新组合，形成新遗传型个体的方式。 是杂交育种的理论基础 重组和杂交的关系 重组是在核酸分子水平上的杂交，与细胞水平上的杂交有明显区别 杂交中必然包含着重组，而重组则不限于杂交一种形式。 Genetic Recombination Homologous or General Recombination RecA protein participation Homologous DNA sequences have the same or nearly the same sequence New genotypes only arise when two homologous sequences are genetically distinct 原核微生物的4种重组形式： 转化 转导 接合 原生质体融合 真核微生物的2种重组形式： 有性杂交 准性生殖 （一） 原核微生物基因重组 1、转化(transformation)： 受体菌直接接受供体菌的DNA片段，将其组合 到自己的基因组中，从而获得供体菌部分遗传性 状的现象。 转化子：转化后的受体菌 转化因子：被转化的DNA 条件： 1、必须是感受态细胞，即受体菌最易接收外源DNA片段并实现转化的生理状态。 2、DNA一般是线状双链DNA。 转染(transfection) ： 用提纯的病毒核酸（DNA或RNA）去感染其宿主细胞，可增殖出一群正常病毒后代的现象称为转染。 即病毒的转化 细菌的转化 dsDNA 供体（strR） 感受态受体（strS） 同源区段配对 单链整合，形成一小段杂合DNA区段 转化子（strR） 非转化子（strS） 复制与分离 转化过程 能进行转化的微生物种类: Streptococcus pneumoniae ；Bacillus ；Rhizobium ；Pseudomonas； Staphylococcus； Saccharomyces cerevisiae； Neurospora crassa； Aspergillus niger等。 但肠道菌科的细菌如E.coli等很难进行转化 2、转导(transduction)缺陷噬菌体当媒介，把供体细胞的DNA片段携带到受体细胞中，从而使后者获得前者部分遗传性状的现象。 转导子：获得部分新性状的重组细胞。 转导类型： 普遍转导 局限转导 溶源转变 ③Col质粒 (col plasmid) （Col因子、大肠杆菌素质粒） ，产细菌素和抗生素质粒。产生的细菌素能抑制或杀死其他近缘细菌或同种不同菌株的细菌。 肠道菌中发现 ④Ti质粒 (tumor inducing plasmid) （产毒质粒、诱癌质粒），是植物基因工程重要载体，可携带外源基因整合到植物基因组中。根癌土壤杆菌中发现 Agrobacterium tumefaciens（根癌土壤杆菌）从一些双子叶植物的受伤根部侵入，最后在其中溶解，释放出Ti质粒，其上的T-DNA片段与植物细胞中的核染色体组发生整合，合成正常菌株所没有的冠瘿碱类，破坏控制细胞分裂的激素调节系统，从而使