Survivin反义核酸诱导乳腺癌细胞凋亡的实验研究.docVIP

Survivin反义核酸诱导乳腺癌细胞凋亡的实验研究 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：Survivin反义核酸诱导乳腺癌细胞凋亡的实验研究 1 1 材料与方法 3 1.6 DNA抽提及电泳 5 2 结果 6 1坏死细胞，2正常细胞 6 1坏死细胞，2正常细胞，3凋亡细胞 7 文2：Survivin反义核酸诱导乳腺癌细胞凋亡的实验研究 7 1 材料与方法 8 1.6 DNA抽提及电泳 11 2 结果 11 1坏死细胞，2正常细胞 12 1坏死细胞，2正常细胞，3凋亡细胞 12 3 讨论 14 参考文摘引言： 17 原创性声明（模板） 18 文章致谢（模板） 19 正文 Survivin反义核酸诱导乳腺癌细胞凋亡的实验研究 文1：Survivin反义核酸诱导乳腺癌细胞凋亡的实验研究 【Abstract】 Objective To explore the effect of cells apoptosis on human breast cancer after survivin was blocked with the antisee technique.Methods The experiments were divided into six groups. Antisee Oligonucleotide (ASODN)， noee oligonucleotide (NODN) was trafected in human breast cancer MCF-7 cell line and RPMI 1640 culture medium (normal control). The study used Hoechst 33258/PI，electron microscope， flow cytometer and in gel electrophoresis of DNA to observe the cells apoptosis.Results The cells apoptosis after trafection were observed by Hoechst 33258/PI，electron microscope and in gel electrophoresis of DNA.The result of flow cytometer showed the cells apoptosis after trafection and the blocking phenomena appeared in G2/M period.Conclusion The restriction by the reduction of survivin expression in breast cancer cells is mainly functioned through its induction of cells apoptosis and prevention of mitosis at G2/M period. Survivin targeting therapy can be used as an important method in breast cancer treatment. 【Key words】 breast cancer；survivin gene；antisee technique；apoptosis 现代分子生物学研究发现与细胞恶性增殖和分化受阻一样，细胞凋亡异常在大多数恶性肿瘤的发病学上亦占有重要地位。诱导肿瘤细胞发生凋亡目前正逐步成为治疗恶性肿瘤的一种重要的治疗方法，具有较高的选择性与靶向性。Survivin是近年来发现的一个新的细胞凋亡抑制基因，能够抑制肿瘤细胞凋亡，使肿瘤细胞得以生存，在肿瘤细胞内导入凋亡活化基因或灭活凋亡抑制基因是肿瘤基因治疗的主要方法。在本实验研究中我们应用荧光染色、电镜、DNA琼脂糖凝胶电泳、流式细胞仪等技术，从细胞形态学到细胞周期、DNA变化，从定性到定量进行了研究。探讨是否可通过转染Survivin反义寡核苷酸（ASODN）诱导乳腺癌MCF-7细胞发生凋亡，为乳腺癌的基因治疗提供理论实验依据。 1 材料与方法 1.1 细胞培养 MCF-7人乳腺癌细胞株由中国科学院上海细胞研究所提供。将加入含10%小牛血清的RPMI 1640培养液制成的细胞悬液，镜下计数，调节细胞至约1×106个/ml，分别接种于30ml培养瓶、96孔培养板及铺有盖玻片的6孔培养板，37℃，5%CO2常规培养至80%汇片后进行转染。 1.2 脂质体介导S