基因的转移技术.ppt

第六章 基因的转移技术 ?;第一节 基因的导入方法; 所谓基因的转移技术就是将外源目的基因或DNA片段引人受体生物或细胞并检查其在转化细胞中表达结果的一种技术。 一．基因导入方法 1．细胞融合 10-6 2．微细胞介导的基因转移 小于或等于10-6 3．染色体介导的基因转移 10-6利用中期染色体DNA进行转移 4．脂质体介导的基因转移 约2×10-4先用脂质体包装DNA，然后与 细菌，植物原生质体融合 5．磷酸钙沉淀介导基因转移 10-3—10-7 6．原生质体融合术 约0.1—0.3%溶菌酶处理细菌，再与动物细胞，植物原生质体融合; 7．显微注射法 约1—10%直接注射入细胞质或细胞核内 显微注射法—利用显微操纵器，将DNA直接注射到细胞核中 穿刺法—利用注射显微镜将微注射针固定，然后穿刺将DNA注入细胞核内; 8．电脉冲介导的基因转移 10-4利用电脉冲改变生物膜透性，DNA可直接进入各种细胞 9．重组RNA病毒感染 约10—100%适用于动植物细胞 10．重组