血红蛋白的提取和分离课件--高二下学期生物人教版选修1.pptxVIP

课题3 血红蛋白的提取和分离;蛋白质的分离技术; 3.原理 相对分子质量较小的蛋白质进入凝胶颗粒内部，路程较长，移动速度较慢； 相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶颗粒内部，路程较短，移动速度较快。 ;（二）缓冲溶液 1.作用： 抵制外界酸碱对溶液pH的干扰而保持PH稳定。 2.配制： 缓冲溶液通常由1-2种缓冲剂溶解于水中配制而成。 3.配制PH值不同的缓冲液： 调节缓冲剂的使用比例; 洗脱：从色谱柱上端不断注入缓冲液，促使蛋白质分子的差速流动。 ;（三）电泳 1.概念： 电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。在电场的作用下，带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。 2.原理： 由于各种分子带电性质、大小、形状不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。 ;3.常用方法： 琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳。 4.测定蛋白质分子量的常用方法： SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 SDS作用： SDS所带负电荷的量超过蛋白质分子原有的电荷量，掩盖了不同蛋白质间的电荷差别，使电泳迁移速率仅取决于分子大小。 ;血液组成成分;血红蛋白的提取和分离;(2)血红蛋白的释放 加蒸馏水(使红细胞吸水涨破)，再加40%体积的甲苯 (溶解细胞膜)，充分搅拌(使细胞破裂)，释放出血红蛋白。 (3)分离血红蛋白溶液 ①将搅拌好的混合液离心，试管中的溶液分为4层： ②将试管中的液