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【定义】
网织红细胞是晚幼红细胞脱核后到完全成熟红细胞间的过渡细胞,属于尚未完全成熟的红细胞,其胞质中残存嗜碱性物质核糖核酸(RNA),经活体染色后,嗜碱性物质凝聚成蓝黑色颗粒,颗粒与颗粒连缀成线,线连接成网,故而得名。
【分型】
根据网织红细胞发育阶段分为4型,分别是:
Ⅰ型(丝球型):红细胞充满网状物,见于骨髓。
Ⅱ型(网型):红细胞网状物结构松散,见于骨髓。
Ⅲ型(破网型):红细胞网状物结构稀少,呈不规则枝点状排列,见于外周血。
Ⅳ型(点粒型):红细胞内为分散的、细颗粒、短丝状网状物,见于外周血。
丝球型
网型
破网型
点粒型
【检测原理】1.普通光学显微镜法
凡含两个以上的深染颗粒或具有线网状结构的无核红细胞,即为网织红细胞。在显微镜下计数1000个红细胞中网织红细胞的百分比或分数。
2.网织细胞计数仪法和血液分析仪法
【操作方法】
1.显微镜试管法操作
(1)加染液:于试管中加入10g/L煌焦油蓝生理盐水溶液2滴,再加新鲜血2滴,立即混匀,置37℃下15~20min。
(2)制片:取1小滴制成薄血涂片,自然干燥。
(3)观察:在低倍镜下选择红细胞分布均匀的部位进行观察。
(4)计数:在油镜下计数至少1000个红细胞中网织红细胞数。
(5)计算:
网织红细胞分数=(计数的网织红细胞数)/1O00,
网织红细胞绝对值(×109/L)=红细胞数×1012/L×网织红细胞分数。
2.显微镜法注意事项
(1)网织红细胞必须活体染色,WH0推荐使用新亚甲蓝染液?,其染色力强且稳定。煌焦油蓝染液操作简单、费用低廉,但易产生沉淀、工作效率不高、精度差。染液与血液比例以1:1为宜?,严重贫血时,可适量增加血量。
(2)为提高网织红细胞计数精度和速度,ICSH推荐使用Miller窥盘?,方法是将Miller窥盘置于目镜内,选择红细胞散在且分布均匀的部位。
(3)用小方格(A)计数红细胞,大方格(B)计数网织红细胞,按下式计算:
(4)注意鉴别网织红细胞与HbH包涵体。Ret为蓝绿色网状或点粒状物质,分布不均,HbH包涵体为蓝绿色圆形小体,均匀散布于整个红细胞内。
【方法学评价】
1.普通光学显微镜法
试管法操作简便、重复性较好。玻片法取血量少、染色时水分易蒸发,造成结果偏低。但显微镜法受主观因素影响较多,且耗时费力。
2.网织细胞计数仪法
可客观地将Ret分成高荧光强度网织红细胞(HFR)、中荧光强度网织红细胞(MFR)、低荧光强度网织红细胞(LFR)3类,有助于化疗、放疗、移植患者的监测。
3.血液分析仪法
网织红细胞绝对值(Ret)、网织红细胞百分比(Ret%)、网织红细胞分布宽度(RDWr)、网织红细胞平均体积(MCVr/MRV)、网织红细胞血红蛋白浓度(HCr)、网织红细胞平均血红蛋白浓度(MCHCr)、网织红细胞血红蛋白分布宽度(HDWr)、LFR、MFR、HFR、网织红细胞成熟指数(RMI,RMI=(MFR+HFR)/LFR×100)。
仪器法优点是测量细胞多,避免主观因素,方法易于标准化。
【参考值】
手工法
成人:0.008~0.02或(25~85)×109/L
新生儿:0.02~0.06
仪器法(RMI)
男性:9.1%~32.2%
女性:12.8%~33.7%
【临床意义】
正常时,外周血网织红细胞中Ⅲ型约占20%~30%,Ⅳ型约占70%~80%,若骨髓增生明显,可出现I型和Ⅱ型网织红细胞。
1.判断骨髓红细胞造血情况
(1)增多:溶血性贫血,放疗、化疗后。
(2)减少:见于再生障碍性贫血、溶血性贫血再障危象。
2.观察贫血疗效:缺铁性贫血、巨幼细胞性贫血患者治疗前,Ret仅轻度增高(也可正常或减少),给予铁剂或维生素B12、叶酸治疗3~5d后,Ret开始上升,7~10d达高峰,2周左右Ret逐渐下降至正常水平,表明治疗有效。
3.骨髓移植后监测:骨髓移植后第21d,如Ret大于15×10?9?/L,表示无移植并发症;小于15×10?9?/L,伴中性粒细胞和血小板增高,可能为骨髓移植失败。
4.网织红细胞生成指数(RPI)
是网织红细胞生成相当于正常人的倍数。?通常Ret生存期限约为2d,若未成熟网织红细胞提前释放入血,Ret生存期限将延长,为了纠正网织红细胞提前释放引起的偏差,用RPI来反映Ret生成速率。
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