无核葡萄的胚挽救技术.pptVIP

* E B L W F I A C D M P Q S U V X Y K O T Z 无核葡萄的胚挽救技术 一、概念 二、方法步骤 三、主要影响因素 四、存在的问题及今后的研究方向 五、参考文献 无核葡萄的胚挽救技术 胚挽救（embryo rescue） 是指对由于营养和（或）生理原因造成难以播种成苗或在发育早期阶段就败育、退化的胚进行早期分离培养成苗. 根据其外植体的不同，胚挽救技术包括子房培养、胚珠培养和胚培养。现在由于试验条件的限制以及远缘杂交胚比正常胚弱小等原因，很难从子房中直接剥离出幼胚进行胚培养，并且子房培养与胚珠培养和胚培养相比，实验操作较为简便，而且能够获得比较满意的结果。因此子房培养应用相对要广泛一些。 胚挽救技术的应用 1、培育早熟品种? 2、培育无核品种? 3、克服远缘杂种不育 4、培育三倍体及其它多倍体新种质? 5、克服多胚品种珠心胚的干扰 一、概念 之前，以有核材料（母本）×无核材料（父本）的杂交方式培育的无核葡萄品种的无核比率很低，且选育1 个品种的周期非常长（10 年以上）。 现利用胚挽救方法可进行“无核×无核”方式杂交，通过胚挽救其后代来培育无核品种，并结合现代生物技术，从而使无核比率成倍提高，且大大缩短了品种的选育时间。自从1982 年Ramming首次报道使用胚挽救技术以来,很多学者也开展了相关研究,并不断加以完善, 使这一技术在无核葡萄育种中得到了广泛的应用 无核葡萄胚挽救技术 是对假单性结实类型的无核品种，在其合子胚败育之前进行人工离体培养使其继续发育，最终萌发成苗，形成完整的植株。 无核葡萄 单性结实型（Parthenocarpy） 假单性结实型（Pseudo-Parthenocarpy）即种子败育型（Stenospermocarpy） (卵细胞不经过受精作用而直接发育成果实) (虽受精，但受精后的胚很快停止发育导致无核果实产生) 85% 受精卵形成的合子胚在发育过程中发生败育,至果实成熟时只留下种子残迹,杂交育种时以无核葡萄作母本将难以得到杂交后代。所以常规的无核育种方法都是以有核品种作母本,无核品种只能作父本。但是这样的杂交组合方式获得的后代中无核株系比率很低 。如果采用胚挽救技术将合子胚在败育之前取出,在适宜的条件下离体培养, 使其发育成熟,并最终使胚萌发形成杂交单株, 就可用无核葡萄品种作母本, 从而使后代的无核比率大大提高。 王跃进等于2000年首次开始选用中国野生葡萄作父本，与欧洲无核葡萄进行杂交，通过胚挽救技术获得无核抗病后代。 秦红无核 秦翠无核 植株生长旺盛，适宜棚架栽培，单株产量15.8 kg，亩产2133 kg左右，极丰产。较抗白腐病、炭疽病，轻感霜霉病、白粉病。适宜中长梢修剪，抗病性及适应性均强，栽培上加强肥水管理。 二、方法步骤 4、移入大田 2、实验室胚挽救 3、胚萌发成苗 1、葡萄的杂交 采集花粉 去雄 授粉 无核葡萄胚培养： 1、取幼果，灭菌 剖开果粒，取出胚珠 2、接种至胚珠发育液体培养基上 3、60天后，在解剖镜下剖开胚珠，取出胚，接种在固体胚萌发培养上 4、胚萌发长成正常苗 5、接至继代培育基上继代扩繁 培养室三角瓶→温室营养钵→苗圃地 胚挽救试管苗的移栽： 三、主要影响因素 为保证获得杂交后的合子胚，一定要用假单性结实的无核葡萄作母本。在亲本选择时除保证无核性状外，选择并培育抗病、早熟大粒、抗逆性强等优良性状是目前的育种方向。无核葡萄胚的发育受基因型的严格控制。有研究者通过无核葡萄与有核葡萄胚挽救杂交后代的抗寒性研究，证实了葡萄抗寒性具有母性遗传现象。因此，在进行葡萄的抗寒性杂交选育中，一定要注意亲本特别是母本的选配。 不同品种，甚至同一品种的不同植株，同一植株的不同部位，其胚发育期的长短是不同的。胚龄指从授粉开始到剥离胚培养的时间天数。胚龄越小越难培养成功，且与胚培养成苗率呈正相关。因此，胚龄是影响胚培养成功的关键因素之一。不同品种胚发生败育的时期不同。应在胚发育到最高程度，但又尚未开始败育的时期进行培养。因此，研究胚败育的过程，确定胚珠接种的最佳时期是胚挽救成功的前提。 1. 优良的树种和品种(基因型） 2. 确定最佳胚挽救时期（胚龄） 无核葡萄胚挽救中选择适宜的培养基是获得成功的关键环节。在胚挽救过程的不同培养阶段所选用的基本培养基类型不同。在胚珠培养阶段，大多数研究者认为Nitsch 或NN 为胚发育的基本培养基效果良好，并经