植物病原细菌研究方法.pptVIP

芽孢的特性: 具有很强的抗热、抗干燥、抗辐射、抗化学药物能力。 含水量低、壁厚而致密，通透性差,不易着色。 新陈代谢几乎停止，处于休眠状态。 一个芽孢萌发产生一个个体。 芽孢的抗热机制： 目前尚不清楚，但可能与以下因素有关，如含水量低、壁厚而致密，芽孢中的酶分子量小，比较耐热。 第五十四页，共一百一十五页，2022年，8月28日 芽孢染色（孔雀绿藏红染色） 染剂Ⅰ 孔雀绿水溶液 5％ 染剂Ⅱ 藏红水溶液 0.5％ 或 碱性品红水溶液 0.05％ 染色方法： 1、涂片固定； 2、加染剂Ⅰ在酒精灯火焰上加热染色1min，勿使染液沸腾和干燥； 3、水洗； 4、染剂Ⅱ染色15s； 5、水洗，风干后镜检。菌体染成红色，芽孢染成绿色。 第五十五页，共一百一十五页，2022年，8月28日 芽孢 菌体 第五十六页，共一百一十五页，2022年，8月28日 常规鉴定方法 全自动微生物鉴定仪--Biolog 植物病原细菌的鉴定方法 第五十七页，共一百一十五页，2022年，8月28日 菌落特征比较 常规细菌鉴定方法 参考：东秀珠等，常见细菌系统鉴定手册，科学出版社，2001 第五十八页，共一百一十五页，2022年，8月28日 第五十九页，共一百一十五页，2022年，8月28日 全自动微生物鉴定仪--Biolog 鉴定原理 Biolog公司独创的碳源利用方法，利用微生物对不同碳源代谢率的差异，针对每一类微生物筛选95种不同碳源，配合四唑类显色物质（如TTC、TV），固定于96孔板上（A1孔为阴性对照），接种菌悬液后培养一定时间，通过检测微生物细胞利用不同碳源进行新陈代谢过程中产生的氧化还原酶与显色物质发生反应而导致的颜色变化（吸光度）以及由于微生物生长造成的浊度差异（浊度），与标准菌株数据库进行比对，即可得出最终鉴定结果。 第六十页，共一百一十五页，2022年，8月28日 第六十一页，共一百一十五页，2022年，8月28日 主要特点 ·快速读取结果 鉴定板由读数仪自动读取吸光值，软件将该吸光值与数据库对比，就可在瞬时给出鉴定结果。试验结果可由系统进行自动分析、记录和打印。 ·强大的数据库 Biolog微生物鉴定数据库容量是目前世界上最大的，可鉴定包括细菌、酵母和丝状真菌在内总计1973种微生物，几乎涵盖了所有的人类、动物、植物病原菌以及食品和环境微生物。 第六十二页，共一百一十五页，2022年，8月28日 BIOLOG在植物病原菌鉴定方面 可鉴定常见的假单胞菌(Pseudomonas,77种)、伯克霍尔德菌(Burkholderia)、黄单孢菌属(Xanthomonas)、果胶杆菌属(Pectobacterium)、食酸菌属(Acidovorax)、根瘤菌属(Rhizobium)等近200种植物致病菌，特别适合各农业大学、研究所及相关机构进行植物病理分析和研究用。 第六十三页，共一百一十五页，2022年，8月28日 BIOLOG在食品工业应用及研究领域提供大量的数据库，包括70多种乳酸菌、30多种双歧杆菌及各类常见的食品必检的致病菌数据库，包括沙门氏菌、李斯特菌、大肠杆菌(含阪崎肠杆菌)、葡萄球菌、弯曲菌、假单胞菌、弧菌、梭菌、志贺氏菌等，用于食品、药品及化妆品行业用于致病微生物鉴定、工业应用微生物研究、质量控制及产品研发等。 第六十四页，共一百一十五页，2022年，8月28日 BIOLOG专门分开提供一个DP(危险微生物)数据库，包含鼠疫耶尔森氏菌、炭疽芽胞杆菌、马尔他布鲁氏菌、土拉弗朗西斯菌、鼻疽伯克霍尔德氏菌(鼻疽假单孢菌)、类鼻疽伯克霍尔德氏菌、苏云金芽孢杆菌、假结核耶尔森氏菌、蜡样芽胞杆菌等12种强致病微生物，适用于国家疾病控制中心、国家安全机构及军事机构用于生物武器检测及防治研究。目前广泛用于美国军方进行生物恐怖检测及预防研究。 第六十五页，共一百一十五页，2022年，8月28日 鉴定初始首先按常规微生物操作方法分离出纯种。 第六十六页，共一百一十五页，2022年，8月28日 鉴定步骤如下：第一步用Biolog专用培养基将纯种扩大培养。第二步按要求配制一定浊度(细胞浓度)的菌悬液。第三步将菌悬液接种至微孔鉴定板(Microplate)，培养一定时间。第四步?将培养后的鉴定板放入读数仪中读数，软件自动给出鉴定结果。 第六十七页，共一百一十五页，2022年，8月28日 第六十八页，共一百一十五页，2022年，8月28日 第六十九页，共一百一十五页，2022年，8月28日 第七十页，共一百一十五页，2022年