维生素与测定.pptVIP

（5）纸层析 点样：在18cm×30cm滤纸下端距底边4cm处作一基线，在基线上取A、B、C、D四点，吸取0.100～0.400mL浓缩液(6.3)在AB和CD间迅速点样。展开：待纸上所点样液自然挥发干后，将滤纸卷成圆筒状，置于预先用石油醚饱和的层析缸中，进行上行展开。洗脱：待胡萝卜素与其他色素完全分开后，取出滤纸，自然挥发干石油醚，剪下位于展开剂前沿的胡萝卜素层析带，立即放入盛有5mL石油醚的具塞试管中，用力振摇，使胡萝卜素完全溶入溶剂中。 （6）比色测定　　用1cm比色杯，以石油醚调节零点，于450nm波长下，测吸光度，以其值从标准曲线上查出β－胡萝卜素的含量，供计算时使用。标准曲线绘制（7）标准曲线制备　　 取β－胡萝卜素标准使用液(浓度为50μg/mL)1.00、2.00、3.00、4.00、6.00、8.00mL，分别置于100mL具塞锥形瓶中，按样品测定步骤进行操作，点样体积为0.100mL，标准曲线各点胡萝卜素含量依次为2.50、5.00、7.50、10.00、15.00、20.00μg。以胡萝卜素含量为横坐标，以吸光度为纵坐标绘制标准曲线。 （8）结果计算 三、维生素E的测定 维生素E又称生育酚，属于酚类化合物。目前已经确认的有四种异构体：α、β、γ、δ生育酚和α、β、γ、δ三烯生育酚。 维生素E的测定方法有：比色法、荧光法、HPLC法