形态学与流式细胞术联合检测嵌合抗原受体-T细胞方法探究.docxVIP

形态学与流式细胞术联合检测嵌合抗原受体-T细胞方法探究 嵌合抗原受体（chimeric antigen receptor，CAR）-T细胞免疫治疗现在已经成为治疗血液疾病的重要治疗技术，并且在临床治疗中取得了较好的效果［1,?2,?3,?4］。CAR-T 细胞在患者体内的存在和扩增与其临床反应密切相关［5］。尤其是CAR-T 细胞免疫治疗主要并发症，细胞因子释放综合征与CAR-T细胞在体内的扩增相一致［6］。所以建立一种可靠的检测方法来追踪CAR-T细胞的数量及变化，不仅有助于观察治疗的效果，而且对于患者的安全也尤为重要。目前检测CAR-T细胞的方法主要有实时荧光定量PCR［7］（real-time quantitative PCR，Q-PCR）与流式细胞术［8,?9,?10,?11］。其中Q-PCR的灵敏度最高，特异性最强。但是每种方法都有其局限性，譬如Q-PCR只能得到拷贝数，而无法看到细胞的表型。流式细胞术会面临抗体特异性不佳等问题。形态学作为一种快速、简洁有效的血液标本检测方法，目前尚未见形态学检测CAR-T细胞的报道。本研究通过分析CAR-T细胞与正常淋巴细胞区别，确定CAR-T细胞的形态学特征。但是仍然存在部分标本不能准确区分CAR-T细胞与形态相似T/NK淋巴细胞和淋巴瘤细胞。针对以上问题，我们探究形态学与流式细胞术联合检测的方法，弥补单种检测方法的不足，以期达到快速