浙江大学生物化学与分子生物学笔记a核酸化学.pptxVIP

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会计学第1页/共23页核酸研究史2核酸化学研究史(2)1889年 Altman建议将“ 核质”改名为“ 核酸”, 因为已经认识到“ 核质” 乃“ 核酸” 与蛋白质的复合体。1909年 Levene 发现酵母的核酸含有核糖1930年 Levene 发现动物细胞的核酸含有一种特殊的核糖--脱氧核糖, 得出了一个错误概念: 植物核酸含核糖,动物核酸含脱氧核糖。这个错误概念一直延续到1938年,这时方清楚RNA和DNA的区别。Levene还提出了核酸的“磷酸-核糖(碱基)-磷酸的骨架结构, 解决了DNA分子的线性问题, 还在1935年提出四核苷酸, 认为这四种碱基的含量是一样的。第2页/共23页核酸研究史3核酸化学研究史(3)1950年 Chargaff,E和Hotchkiss,R.D.采用纸层析法仔细分析了DNA的组成成分, 得知[A]=[T], [G]=[C], [A+G]=[C+T]1953年 Watson, Crick根据DNA的X射线图谱的研究结果, 提出了DNA的双螺旋模型(Double helix)。几星期后提出了半保留式复制模型。1957年 Meselsnhe Stahl用密度梯度超离心法, 证实半保留复制假说。第3页/共23页核酸研究史4核酸化学研究史(4)1958年 Kornberg得到高纯度的 DNA polymerase, 这种酶需要一个模板DNA。1960年 Cairns索性将复制中的细菌DNA的电镜照片拍了下来。1970年 发现第一个DNA限制性内切酶。1972年 DNA重组技术的建立。1978年 双脱氧DNA测序法的建立。1990年 人类基因组计划实施。第4页/共23页核酸研究史5核酸化学研究史(5)rRNA1. 早在本世纪30年代后期就发现细胞质和细胞核中都有核酸存在,但用1924年福尔根发明的染色法去染色,只能使细胞核中的核酸染色。但两种核酸在260nm的吸收非常相似。2. 1941年,细胞学家J.Brachet和T.Caspersor注意到细胞质中的核酸与蛋白质的合成有密切的关系。3. 50年代,有人用电子显微镜和物理化学手段发现大肠杆菌细胞质的RNA常常存在于蛋白质合成相关的颗粒中(Ф20nm,用35S进行脉冲式标记的实验证明该颗粒是蛋白质合成的所在地),简称核糖体。4. 核糖体得到分离后,发现里面含RNA,即称rRNA。Watson等发现rRNA的G≠C,A≠U,断定是一单链分子。第5页/共23页核酸研究史6核酸化学研究史(6)mRNA1. 1948年有人报道,当噬菌体感染了细菌后会产生一种很不稳定的RNA,而大多数是和核糖体结合在一起。2. Brenner, Jacob等人用13C,15N标记蛋白质,用32P标记核酸的方法证实了这是一种新的RNA分子,命名为信使RNA, 即mRNA (m, messenger)。3. 1961年,Spielman创造了分子杂交法,通过32P -mRNA-DNA杂交分子证明了mRNA的存在。第6页/共23页核酸研究史7核酸化学研究史(7)tRNA1. 1957年Hoagland, M.B.发现一类稳定的RNA小分子,不与核糖体结合,因而不同于mRNA和rRNA。2. Crick, F.比较了核酸和氨基酸的大小和形状后,认为不可能在空间上互补,因此他对核酸→蛋白质的信息传递作了以下预测:1). 它是一种分子转换器,使信息从核酸序列转换成氨基酸序列;2). 这种分子很可能是核酸;3). 它不论以何种方式进入蛋白质翻译系统的模板,都必须与模板形成氢键(即配对);4). 有20种分子转换器,每种氨基酸一个;5). 每种氨基酸必定还有一个对应的酶,催化与特定的分子转换器结合。3. 1963年, Ehrenstein等人用实验证明了Hoagland 发现的分子就是Crick预言的分子转换器,即tRNA。4.1965年Holley经过7年的努力测出酵母Ala-tRNA序列。第7页/共23页核酸研究史8核酸化学研究史(8)遗传密码的破译1953年 Dounce假设DNA通过RNA将信息传给蛋白质,RNA上每三个核苷酸 形成一个“ 空洞”,正好将一个个氨基酸装进去。该假说允许三 联体的重叠。命中率80%1954年 物理学家Gamow,与Teller等人联手,也提出三联体学说,并指出 不可重复的特点。命中率20%1957年 Crick也提出了三联体的假说。他意识到要解决“ 天书”的“ 词法” 和“ 句法”,必须要有一本标准词典,以便决定64种组合中的44种 是无用的。即“ 简并密码”和“ 阅读框”1961年 Crick在Bencer,S的突变实验的基础上,用重组法得到了+++和--- 型,发现读框和野生型一致,从而证明了三联体的假说。1961年 Nir

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