感染性疾病标志物及快速诊断ppt课件下载.ppt

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感染性疾病标志物及快速诊断 技术;概 述;感染的诊断依据;感染的分类;临床希望第一时间知道的信息;一、免疫学方法 ;(一)降钙素原;降钙素原 PCT : 分子结构;Linscheid P, et al Crit Care Med 04; 32: 1715-21 Endocrinology 03; 144: 5578-84 05; 146: 2699-708;细菌感染后PCT快速升高;PCT来源;PCT动力学;PCT检测方法;快速半定量法(PCT-Q);全自动快速定量法;PCT临床意义;细菌感染诊断及严重程度判断;脓毒症患者治疗效果及预后监测;抗生素有效管理;PCT的临床应用; 48hr的新生儿 - 生理性一过性峰值 创伤后炎症综合症: 多发性创伤, 大面积烧伤, 大手术后 (心脏, 移植, 腹部) 使用致炎细胞因子治疗后 (OKT3, 注射 TNFα, IL-2, 抗淋巴细胞球蛋白) 某些肿瘤 (甲状腺髓样细胞癌, 肺小细胞癌和支气管癌) 长时间循环衰竭 (心源性休克, 出血性休克, 热休克);感染早期 (- 6-12 小时后重复检测!) 亚急性心内膜炎 局部感染; PCT检测影响因素;(二)细菌内毒素;·;细菌内毒素检测;仪器和试剂;标本要求;内毒素活性定量检测意义;内毒素定量检测的适应症;1.1,3-β-D-葡聚糖-G试验;标本要求;G试验的临床意义;(三)半乳甘露聚糖(GM);标本要求;GM试验临床意义;G试验和GM试验提高对IFI 的诊断。 阳性预测值可达100%。;其它;(四)结核分枝杆菌的快速诊断;结核感染现状;全球结核疫情;结核检测方法; ;结核夹层杯技术;检测流程示意图;镜下比较;;结核夹层杯技术;结核感染T细胞检测技术;γ-干扰素释放实验 (IGRA,interferon- gamma release assay) 酶联免疫斑点技术 (ELISPOT,Enzyme-Linked ImmunoSpot assay) 结核杆菌特异抗原 早期抗原靶6(ESAT-6) early secreted antigenic target 6 培养滤液蛋白10(CFP 10) culture filtrate protein 10 );结核感染者体内存在特异的效应T淋巴细胞,效应T淋巴细胞再次受到结核抗原刺激时会分泌多种细胞因子(IFN-γ)。因此,检测效应T淋巴细胞可用于结核病或结核潜伏感染者的诊断。 由于效应T细胞存活时间很短,而且具有特异性,因此可以作为机体是否正处于被感染的指标,无论是否有临床症状。 基于IGRA原理的检测项目目前已被美国、加拿大、英国、德国、意大利、瑞士、法国、荷兰、日本等二十余个国家写入本国的结核诊疗指南中;酶联免疫斑点技术(ELISPOT);酶联免疫斑点技术(ELISPOT);结核杆菌特异抗原;操作步骤;操作步骤;实 际 效 果 图;T-SPOT.TB 特点;写入诊疗指南的国家(Guidelines);1、结核病辅助诊断/疗效评价 “菌阴”结核病患者的辅助诊断 肺外结核的鉴别诊断 抗痨治疗的疗效评价 2、免疫力低下/受抑制患者的结核诊断/感染筛查 使用生物制剂/免疫抑制剂患者的结核感染筛查 HIV感染者/肾透析患者/器官移植患者 3、儿童结核病的辅助诊断 4、结核密切接触者/高危人群的结核感染筛查 结核病患者的家属/医务工作者/监狱囚犯 5、接触追踪;结核相关疾病;评 价; (五)荧光抗体技术 ; 1.直接荧光抗体法; 病毒抗原检测;; (1)呼吸道病原体IgM抗体检测;; (2)载玻片结合抗原;; (3)九联检的检测价值;;;(三)酶联免疫技术 ; 二、分子生物学技术;分子诊断技术检测致病菌;(一)DNA 分子中G+C 百分含量的测定 ; (二)DNA-DNA 杂交 ;(三)核酸扩增技术 ; 1. 16S rDNA鉴定 ;1. 16S rDNA鉴定 ;16S rRNA具有多拷贝多信息的特点;2. 16s-23s rDNA鉴定 ;3. 核酸探针技术;4.环介导等温扩增技术;(2)扩增原理;;·;(3)检测方法;(4)LAMP试验缺陷;三、生物传感器 ;生物传感器;微生物传感器;Schematic diagram of BOD monitoring system for anaerobic wastewater treatment process;影响传感器响应的因素;四、生物芯片 ; 生物芯片基本类型;五、质谱分析技术 ;;; MALDI-TOF MS技术;MALDI-TOF: 基质辅助激光 解吸/电离-飞行时间质谱分析法 (MS);

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