植物生理学实验.docxVIP

试验一：植物组织渗透势的测定（质壁分别法）试验目的 观看植物组织在不同浓度溶液中细胞质壁分别的产生过程，了解其用于测定 植物组织渗透势的原理与方法。 试验基本原理 当植物组织细胞内的汁液与其四周的某种溶液处于渗透平衡状态，植物细胞 内的压力势为零时，细胞汁液的渗透势就等于该溶液的渗透势。这种渗透势相等 的溶液称为等渗溶液。该溶液的浓度称为等渗浓度。 当用一系列梯度浓度溶液观看细胞质壁分别现象时，细胞的等渗浓度将介于 刚刚引起初始质壁分别的最低浓度和尚不能引起质壁分别的最高浓度之间的溶 液浓度。代入公式即可计算出其渗透势。 试验用品.材料：洋葱鳞茎 .器材和仪器：显微镜、载玻片及盖玻片、镶子、刀片.试剂：100mL浓度1 mol/L蔗糖溶液 用蒸储水配置 0.10, 0.15, 0.20, 0.25, 0.30, 0.35, 0.40, 0.45, 0.50mol/L 蔗糖梯度 溶液各5-10mL方法步骤 1、取带洋葱鳞茎下表皮（用单面刀片划约5 mm*5 mm方块用镒子将其取下）， 快速分别投入各种浓度的蔗糖溶液中使其完全浸入，约10 mine2、从0.50 mol/L蔗糖溶液开头依次取出表皮薄片放在滴有同样溶液的载玻片上, 盖上盖玻片，于1。倍显微镜下观看，假如全部细胞都产生质壁分别的现象， 则取低浓度溶液中的制片做同样观看，并纪录质壁分别的相对程度。 3、确定引起半数以上细胞原生质刚刚从细胞壁的角隅上分别的浓度，和不引起 质壁分别的最高浓度。 4、在找到上述浓度极限时，用新的溶液和新奇的叶片重复进行几次，直至把握 精确为止。在此条件下，细胞的渗透势与两个极限溶液浓度之平 均值的渗透势相等。 5、将结果纪录到下表1-1中。 测出引起质壁分别刚开头的蔗糖溶液最低浓度和不引起质壁分别的最高 浓度平均值之后，代入下列公式，-6s=R77C7计算在常压下该组织细胞 质液的渗透势。 其中：?6s为细胞渗透势； R 为气体常数=0.083*105 L Pa/mol-K； T为热力学温度，单位K；即273 + 3 t为试验温度，单位是℃； i为解离系数，蔗糖为1; C7为等渗溶液的质量摩尔浓度，单位是mol/kg 贝ij-6s = 0.083*105* （273 + z） *1*C7 测定酶的活性要留意掌握那些条件？ 要测定过氧化物酶的活性，除比色法外，你还知道其他什么方法？ 试验六：根系活性的测定（a —蔡胺氧化法）目的要求 把握a 一蔡胺氧化法测定植物根系活力的原理与方法。 基本原理植物根系是活跃的汲取器官和合成器官，根的生长状况和活力水平直接影 响地上部的生长和养分状况及产量水平。测定根系活力为植物养分讨论供 应依据。 植物的根系能氧化吸附在根表面的。一蔡胺，生成红色的a—羟基一1— 蔡胺，沉淀于有氧化力的根表面，使这部分根染成红色，其反应如下： 根对a —蔡胺的氧化力量与其呼吸强度有亲密关系。有报道认为a —蔡胺 氧化的本质就是过氧化物酶的催化作用，该酶的活力愈强，对a—秦胺的 氧化力也愈强，染色也愈深。所以，可依据染色深浅定性地推断根的活力；也可测定溶液中未被氧化的Q—蔡胺量，以确定根系活力的大小。蔡 胺在酸性环境中与对氨基苯磺酸和亚硝酸盐作用生成红色的偶氮染料，可 供比色测定a—蔡胺含量。 试验用品 材料：水培或砂培水稻、小麦、玉米，大蒜，洋葱等植物根系。 器材和仪器：分光光度计、电子天平、培育箱、三角烧瓶、量筒、移液管、 容量瓶等试剂：a—蔡胺溶液（称10 mg a—蔡胺，先用2ml左右的95%酒精溶 解，然后加水到200 ml,成50 ug/ml的溶液。另取150 ml 50 u g/ml溶 液再加水150ml成25 Ug/ml的a—蔡胺溶液）， ? 0.lmol/L磷酸缓冲液（pH7.0）, 1%对氨基苯磺酸（将1g对氨基苯磺酸溶 解于100ml 30%的醋酸溶液中），亚硝酸钠溶液（称10mg亚硝酸钠溶于 100 ml 水中）。 方法步骤1、定性观看： 用水冲洗根部所附着的砂粒，洗净后再用滤纸吸去附着在大蒜根上的水分。 然后将植株根系浸入加有50 Ug/mL的a —秦胺溶液与磷酸缓冲液（pH7.。）等量 混合液50 mL的 三角烧瓶（100 mL）中。容器的外面用黑纸包裹，静置24?36 小时后观看根系着色状况。着色深者，其活力较着色浅者为大。 2、定量测定： a—蔡胺的氧化： 1取出培育的植株，并用水洗净根系上的砂粒，剪下它的根系，再用水洗，待 洗净后用滤纸吸去根表面的水分，称取1?2 g放在100 mL三角烧瓶中。然 后加50 P g/mL的a —秦胺溶液与磷酸缓冲液（pH7.0）等量混合液50 mL, 轻轻振荡，并用玻璃棒将根全部浸入溶液中，静置10分钟。 2吸取2 mL溶液，测定Q—蔡胺含量［测定方法见下面（