分子生物学实验实验操作.pptxVIP

会计学;基因、载体、受体菌株;实验技术要求;实验流程: 第一天;实验流程: 第二天;实验流程: 第三天;实验流程: 第四天;双酶切反应（20μL体系）;Hybrid site;培养基配制;灭菌;琼脂糖电泳;琼脂糖凝胶回收;1.通过琼脂糖凝胶电泳将目的DNA片段与其他片段尽可能分开，然后用干净的手术刀切下含需回收DNA的琼脂块，放入Ep管。 2.按300μL/100mg（3:1）的比例加入 Binding BufferⅡ，置于50-60℃水浴中10min，使凝胶彻底融化。期间，每2 min混匀一次。 3.将融化的溶胶液转移到套在 2-ml 收集管的UNIQ-10柱中，室温放置 2 min。12000 rpm 室温离心 1 min。 4.取下UNIQ-10柱，倒掉收集管中的废液，将UNIQ-10柱放入同一个收集管中，加入500μL Wash Solution，12000 rpm 室温离心 1 min。 5.重复步骤4一次。;6.取下UNIQ-10柱，倒掉收集管中的废液，将 UNIQ-10 柱放入同一个收集管中，12000 rpm 室温离心 2 min。 7.将 UNIQ-10 柱放入一根新的 Ep 管中，在柱子膜中央加30μL Elution Buffer，60℃放置 5min。 8.12000 rpm 室温离心 1 min ，离心管中的液体即为回收的DNA片段。 从溶液中回收DNA：