分子生物学实验技术核酸的凝胶电泳学习.pptxVIP

会计学;Content of Table;前 言;核酸凝胶电泳的基本原理;一、 琼脂糖凝胶电泳Agarose gel electrophoresis;（一）凝胶的制备及电泳;;（二）DNA的迁移速率决定因素; 1 DNA分子的大小 双链DNA分子迁移的速率与其碱基对数的常用对数近似成反比； 2 琼脂糖浓度 浓度越低，相同核酸分子迁移越快； ; 3 DNA的构象 一般同一分子：超螺旋环状＞线状＞切口环状。 4 凝胶和电泳缓冲液中的溴化乙锭 溴化乙锭（EB）插入双链DNA造成其负电荷减少、刚性和长度增加。; 5 所用的电压 低电压时DNA片段迁移率与所用的电压成正比。 6 琼脂糖种类 常见的有两种：标准琼脂糖和低熔点琼脂糖；; 不同类型琼脂糖的性质;不同类型琼脂糖分离DNA片段的范围; 7 电泳缓冲液 常用的有TAE、TPE及TBE;TAE、TPE及TBE电泳缓冲液比较;（二） 凝胶载样缓冲液;6×凝胶载样缓冲液;（三）琼脂糖凝胶中DNA的检测;1 凝胶的EB染色;第19页/共42页;第20页/共42页;使用EB染色注意事项; （3）EB使用时的配制、贮存及使用 EB常用水配制成10 mg/ml的贮存液，于室温保存在棕色瓶或用铝箔包裹的瓶中，使用终浓度为0.5 μg/ml