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会计学;
第一部分
直接抗人球蛋白试验原理;直接抗人球蛋白试验原理 ：
直接抗人球蛋白试验是检测红细胞在体内是否被
不完全抗体致敏的实验。若红细胞在体内已被不完全
抗体所致敏，加入的抗人球蛋白则可与红细胞表面不
完全抗体结合使红细胞相互连接起来出现凝集现象。
——直接抗人球蛋白试验阳性
;
;抗球蛋白试剂通常有三种：
多特异性抗球蛋白试剂，简称多抗，多抗包括了抗-IgG和抗- C3两种成分，在直抗试验中常常作为初筛试剂使用。
单特异性抗-IgG试剂，简称抗-IgG
单特异性抗-C3试剂，简称抗-C3
在直抗试验中一旦出现阳性结果，通常需要抗-IgG和抗-C3进一步分析。 ; 直接抗人球蛋白试验临床意义
检测体内红细胞是否被不完全抗体或补体致敏,可用于：
1）新生儿溶血病胎（婴）儿致敏红细胞检测
2）自身免疫溶血性贫血的诊断
3）溶血性输血反应的研究
;
第二部分
直接抗人球蛋白试验操作;直接抗人球蛋白试验难点：
难以获取致敏红细胞标本？
解决方案：
试剂红细胞+IgG抗D血清（人工致敏RBC)
;受检标本
红细胞悬液配制：
1. 抗凝全血 2ml（与抗凝剂混匀）
1000g 离心3min
分离上层血浆
2. 压积红细胞的制备：NS洗涤三次，注意离心速度及时间 （1000g离心1min）
（注意操作轻柔，防溶血！）
3. 取压积红细胞配成5％的红细胞悬液（1d压积红细胞＋19d NS）
; 人工制备IgG型致敏红细胞（阳性对照）：
1、采集3人份O型RhD阳性抗凝全血，1000g离心3min，分离血浆；红细胞经生理盐水（NS）3次洗涤后，取3人份的压积红细胞各5滴混匀，备用；
2、用一次性吸管取压积红细胞3滴于试管中，加入2倍体积的单克隆IgG抗D血清，混匀，置于37℃孵育45min；
3、孵育结束取出试管，1000g离心2min，弃上清，用2倍体积的NS洗涤3次（1000g离心1min），最后加入NS配制成约5％的致敏红细胞悬液（1d压积红细胞＋19d NS），备用
; 未致敏红细胞（阴性对照）：
取3滴3人份???合压积红细胞，加入57滴NS混匀，备用。 （无须单克隆IgG抗D血清致敏）;标记3支试管，分别为待检管、阴性对照和阳性对照。按下表加入各反应物：
反应物 待检管 阴性对照 阳性对照
5％待检标本RBC 1
5％阴性对照RBC 1
5％阳性对照RBC 1
多特异性抗球蛋白试剂 1 1 1;混匀，1000g离心15s，观察凝集反应，记录结果。
如果使用的是多特异性抗球蛋白试剂或抗C3抗球蛋白试剂，将未出现反应的试管置室温孵育5min，再离心，观察凝集。
实验结果阴性时，应按照试剂说明书要求验证阴性结果的正确性。加1滴IgG致敏5％红细胞悬液于未出现凝集的试管中，1000g离心15s，观察凝集，记录结果。 ;如阳性对照凝集，阴性对照不凝集，受检RBC凝集者直接抗球蛋白试验为阳性，不凝集者为阴性。
;标本采集后应尽快进行试验，试验延迟或中途停止可能使抗体从细胞上释放出来。
待检红细胞一定要用盐水洗涤至少3次，除去红细胞悬液中混杂的血清蛋白，以防止假阴性结果。
离心时间和离心力要按标准操作。
若果要了解在体内致敏红细胞的免疫球蛋白类型，则可分别以抗IgG、抗IgM或抗C3单特异性抗球蛋白试剂进行试验。
红细胞上若抗体吸附较少，自身免疫性溶血性贫血直接抗球蛋白试验可呈阴性反应。
全凝集、冷凝集血标本或脐血标本，试验前应
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