第十六原核生物基因表达的调控.pptxVIP

第十六原核生物基因表达的调控会计学第1页/共48页操纵子（operon)顺式作用元件（cis-acting element）结构基因（ structural genes）调节基因（regulator genes）。反式作用因子（trans-acting factor）。诱导物（inducer）和效应物（effectors）可诱导的基因和组成型基因控制位点（controlling site）诱导（induction）第2页/共48页正调控负调控诱导(induction)阻遏(repression)诱导物(inductor)阻遏物(repressor)辅阻遏物(corepressor) 使阻遏蛋白具有活性或使活性蛋白失去活性的物质称～。第3页/共48页未发现第4页/共48页1 调控位点 (1) Operator操纵基因 (2) CAP(catabolite gene activation protein) or CRP(cAMP受体蛋白)结合位点 (3) Promotor 2 别乳糖为诱导物 3 本底组成型(background constitutive synthesis) 组成型(constitutive gene) 即看家基因（Houskeeping gene) 第5页/共48页乳糖第6页/共48页第7页/共48页诱导物的加入和去除对lac mRNA的影响第8页/共48页第9页/共48页第10页/共48页1961年 Jacob Monod构建部分二倍体(lacI-/FlacI+)lacIS 阻遏蛋白不可诱导性突变，阻遏 蛋白失去诱导物结合位点lacI- 阻遏蛋白不能形成寡聚物lacI-d 阻遏蛋白不能和DNA结合，且呈 负互补(反式显性)Oc操纵基因的组成型突变第11页/共48页第12页/共48页第13页/共48页 (二) 阻遏蛋白和诱导物的互作诱导（induction）诱导物（inducers）异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（isopropylthiogalactoside,IPTG）安慰诱导物（gratuitous inducer） 多顺反子mRNA 变构调控（allosteric control） 协同调控（coordinate regulation）一系列基因受同一操纵子的调控。 基因簇(cluster)第14页/共48页第15页/共48页第16页/共48页第17页/共48页第18页/共48页第19页/共48页等位基因间的互补（interallelic complementation）。负的互补（negative complementation） lacI-d的产物和lacI+的产物组成多聚体时，阻遏蛋白无活性。反式显性（trans-dominant）显性失活（dominant negatives）第20页/共48页 阻遏蛋白和操纵基因的结合与解离操纵基因的结构阻遏蛋白的结构：N端1～59aa－头部片段：为HTH，与操纵基因DNA的大沟结合；核心区：有6个?折叠，诱导物就结合在两个核心区之间的裂缝中；C端为两组亮氨酸拉链，形成四聚体。 操纵位点的回文序列第21页/共48页 阻遏蛋白单体的结构第22页/共48页第23页/共48页阻遏蛋白单体的三级结构第24页/共48页第25页/共48页第26页/共48页诱导物的结合解离模型第27页/共48页诱导物和阻遏蛋白结合的模型阻遏能发生在多个位点上第28页/共48页 CAP结合位点 第29页/共48页cAMP是由腺苷环化酶（adenylate cyclase） 催化合成CAP（catabolite activator protein）CAP以两种方法来激活转录： （1）它可能直接和RNA Pol相互作用； （2） 作用于DNA，改变其结构，从而帮 助RNA Pol结合。 第30页/共48页第31页/共48页第32页/共48页第33页/共48页第34页/共48页第35页/共48页第二节 操纵子的其它调控形式一半乳糖操纵子（gal operon）1.结构： (1)双启动子； (2)双操纵基因； (3) 无－35顺序； (4) OE在CAP位点内，OI在 gene E内 Gal 既可为碳源，同时UDP－Gal 又是合成细菌细胞壁的重要前体第36页/共48页 gal 操纵子的结构第37页/共48页第38页/共48页(1)有Gal P1启动 K,T,E 转录 无 Glu无Gal P1不启动 无Gal OE,O I 结合形成环，仅转 有 录20b 有Gal P2启动 S2 转录E,组成型(2) CAP-cAMP对P1 正调节，对P2 抑制(3) 阻遏物对P1，P2 都是负调控， CAP-cAMP 含量少时P2 可转录 (机制不清)(4)P1与