《免疫学实验》课件-实验三 细菌革兰氏染色1.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * 实验三细菌革兰氏染色 一、实验目的 学习微生物制片、染色的基本技术； 掌握细菌革兰氏染色及无菌操作技术； 学习显微镜（特别是油镜）的使用； 进一步观察细菌的基本形态。 C.Gram（革兰）于1884年 发明的一种鉴别不同类型 细菌的染色方法。 二、实验原理 革兰氏染色 1、用碱性染料结晶紫对菌液涂片进行初染 2、用碘溶液进行媒染，其作用是提高染料和细 胞间的相互作用从而使二者结合得更牢固。 3、用乙醇或丙酮冲洗进行脱色。在经历脱色后 仍将结晶紫保留在细胞内的为革兰氏阳性细 菌，而革兰氏阴性细菌的结晶紫被洗掉，细 胞呈无色。 4、用一种与结晶紫具有不同颜色的碱性染料对 涂片进行复染。例如沙黄，它使原来无色的 革兰氏阴性细菌最后呈现桃红到红色，而革 兰氏阳性细菌继续保持深紫色 革兰氏阳性菌细胞壁结构图 革兰氏染色阳性细菌肽聚糖层厚，含量多，经乙醇处理后使之发生脱水作用而使孔径缩小，结晶紫与碘的复合物保留在细胞内而不被脱色，复染后不着色，不留结晶紫的颜色； 实验原理 革兰氏阴性菌细胞壁结构图 而革兰氏染色阴性细菌肽聚糖层很薄，含量少，脂肪含量高，经乙醇处理后部分细胞壁脂类可能被溶解并改变其组织状态，细胞壁孔径变大或