《免疫学实验》课件-试验三 抗生素与细菌的药敏实验.pptVIP

药敏试验方法1－LB肉汤稀释法 4 8 16 32 64 128 256 ug/ml 混 混 清 抗生素倍比稀释，种菌105CFU/ml ， 孵育35℃， 16-20h，判读 细菌药敏试验-宏量稀释法 104 cfu 4 2 1 0.5 0.25 0.12 0 mg/ml 微量液体稀释法 * 2、纸片扩散法（disc diffusion test) （Kirby-Bauer法） 原理： 将浸有抗菌药物的纸片贴在涂有测试菌的琼脂平板上。抗菌药物向琼脂四周扩散形成递减的梯度浓度。 药物敏感细菌在纸片周围一定距离内的生长受到抑制，形成抑菌圈。 抑菌圈的大小反映测试菌 对药物的敏感程度。 二者呈正相关。 * 抑菌圈边缘的药物浓度 与 MIC * 抑菌圈的大小与MIC： 二者呈负相关，即抑菌圈愈大，MIC愈小。 * * 细菌细胞膜外是一层坚韧的细胞壁，能抗御菌体内强大的渗透压，具有保护和维持细菌正常形态的功能。细菌细胞壁缺损后，由于菌体内的高渗透压，在等渗环境中水分不断渗入。致使细菌膨胀、变形，在自溶酶影响下，细菌破裂溶解而死亡。 细菌细胞壁主要结构成分是肽聚糖（粘肽），由N-乙酰葡萄糖胺和N-乙酰胞壁酸重复交替联结而成。 肽聚糖的生物合成可分为胞浆内、胞浆膜与胞浆膜外三个阶