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液相增加柱效提高灵敏的小诀窍会计学第1页/共15页液相色谱柱: Zorbax StableBond-C18色谱柱尺寸: 4.6 x 150 mm, 5μm环保除草剂: 柱温的影响Herbicides: Effect of Column Temperature1. 西玛津2. 敌草隆3. 扑灭津4. 扑灭净5. 异丙甲草胺40℃样品:除草剂 流动相: 52/48 0.1 M乙酸钠/甲醇, pH 6 流速: 0.45 mL/min 温度: 40℃, 90℃ 检测: UV 90℃ 1. Simazine2. Diuron3. Propazine4. Prometryn5. etolachlor提高柱温，可增加柱效（提高灵敏度）第2页/共15页液相色谱柱: Zorbax 300 StableBond-C3色谱柱尺寸: 4.6 x 150 mm, 5μm 生物制药肽类/蛋白质: 升温对分离的影响Peptides/Proteins: Effect of Elevated Temperature1. 亮氨酸脑啡呔 2. 血管紧张素II3. 核糖核酸酶A 4. 牛胰岛素 5. 细胞色素C 6. 溶菌酶 7. 肌红蛋白 8. 碳酸酐酶1.Leucine Enkephalin2. Angiotensin II3. Rnase A4. Insulin(BOV)5. Cytochrome C6. Lysozyme7. Myoglobin8. Carbonic anhydrase样品:多肽 流动相: A = 5: 95, 乙腈 :水, 0.10%三氟乙酸 (V/V%) B = 95: 5, 乙腈 :水, 0.085%三氟乙酸 (V/V%)梯度:在 20 min内 15-53%, 后运行时间 12 min 流速: l.0 mL/min 温度:室温 -60℃ 检测: UV 215 nm 提高柱温，可增加柱效（提高灵敏度）第3页/共15页液相色谱柱: Zorbax StableBond-C8色谱柱尺寸: 150 mm, 5μm生物制药减小毛细管内径来提高低浓度样品的检测灵敏度Reducing Capillary ID to Improve Sensitivityfor Concentration-Limited Samples流动相: 60%乙腈/40%水 流速:内径 0.3 mm-4 uL/min 内径 0.5 mm-10 uL/min 内径 1.0 mm-50 uL/min 内径 4.6 mm-1.0 uL/min 温度:室温 检测器: UV 254 nm 样品: 200 ng联二苯 (100 nl) 减小柱径，可增加柱效（提高灵敏度）响应时间: 4.0秒响应时间: 2.0秒响应时间: 1.0秒响应时间: 0.5秒响应时间: 0.1秒第4页/共15页液相色谱柱: ZORBAX StableBond-C18色谱柱尺寸: 4.6 x 15 mm 3.5μm色谱柱技术 – 5988-6454EN使用小体积色谱柱对于检测器响应时间的重要性 (TE32)1.尿嘧啶2.乙酰水杨酸3.N-乙酰苯胺1.Uracil2.Acetylsalicylic acid3.Acetanilide流动相: 乙腈: 1%甲酸=32: 68UV: 254 nm流速: 1.0 mL / min. 30°C进样量: 5 μL缩短检测器响应时间，可增加柱效 （提高灵敏度）第5页/共15页色谱柱技术 ：不同硅胶类型比较 (TE1)液相色谱柱甲苯N-苯甲酰苯胺苯酚苯甲醇Zorbax SilSpherisorbZorbax Rx-Siltoluenebenzanilidephenolbenzyl alcohol流动相: 含0.05%甲醇的二氯甲烷 使用高纯硅胶，可增加柱效（提高灵敏度）第6页/共15页有机化学– 5988-6366ENpH对苯胺取代物分析的影响 (ORCH1)液相色谱柱: ZORBAX StableBond-C18色谱柱尺寸: 4.6 x 150 mm 5μm对位甲氧基苯胺间位苯甲胺3-氨基-苯甲腈对位氯苯胺间位氯苯胺邻位氯苯胺pH: 2.5pH: 7.0 流动相25mM磷酸: 甲醇=58: 42 流速: 1 mL/min 22°C改变流动相pH，可增加柱效（提高灵敏度）第7页/共15页液相色谱柱: ZORBAX 300 SB-C8色谱柱尺寸: 4.6 x 150 mm 5μm生化 –肽– 5988-6293EN三氟乙酸浓度对于反相肽的分离的影响 (B10) Peptide流动相: A: 水和三氟乙酸B: 乙腈和三氟乙酸0 - 30%
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