切胶回收的步骤.pdfVIP

切胶回收的步骤 1．琼脂糖凝胶电泳目的基因，紫外灯下切除含有目的基因的琼脂糖，用纸巾吸尽凝胶表面 的液体，尽量减少不含目的基因的凝胶量，称重（1mg=1ul） 2．尽量切碎凝胶 凝胶浓度 NAL溶液体积 1% 3倍凝胶体积 1-1.5% 4 1.5-2% 5 3．向离心管中加入3倍体积的NAL溶液， 55 （视具体胶定）度加热，使凝胶完全融化， 4．按每20ul硅胶树脂结合（树脂使用前要充分混匀）约3ugDNA加入适量比例的硅胶树脂， 充分混合，室温放置20min， 5．10000rpm离心1分钟，去上清（上清液暂保存，如回收率不过可重复4） 6．加入800ul清洗液（清洗液加入56ml100%的无水乙醇），振荡混匀后，室温静置10min， 10000rpm离心1分钟，去上清 7．重复步骤6，尽量去除上清，完全风干至不残留乙醇味道； 8．加入和硅胶树脂等体积的TEbuffer或灭菌蒸馏水混匀，55度水浴20min 9．10000rpm离心1分钟，吸上清为DNA 回收液， 10． 重复8，9