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实验一 不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳;注意事项:;◇ 主要过程 ◇;实验分组(每人做一管,每3-5人配一份胶)
?认清试剂(试剂和吸管对号、量器的使用)
?
封管
?
分离胶配制与灌胶
(浓度为6%,每组总体积为10ml,灌胶高度为7~8cm)
封正丁醇3mm
(手法、高度、观察界面变化和判断凝固、时间掌握15min);浓缩胶配制(浓度为3%,光聚合,每组总体积为4ml,灌胶高度为1.5cm,留1cm空加样)
?
倒掉正丁醇
灌浓缩胶
?
封正丁醇3mm(观察界面,判断凝固时间)
?
安装电泳槽(结构、原理、电流及电极的方向、不漏水、除气泡);样品处理并加样(20ul)?加buffer?电泳(浓缩胶时3mA/管,分离胶时2mA/管,距底1cm时停止)剥 胶;;(一)电泳的基本原理及相关知识;? 电泳的概念;? 电泳的基本原理;? 电泳分离蛋白质的原理;? 实验室中常用到的电泳方法
(以介质分类);? 电泳的影响因素;(二)、聚丙烯酰胺凝胶电泳 ;;? 合成聚丙烯酰胺凝胶的两种方法 ;? 聚丙烯酰胺凝胶分离蛋白质的原理;; ;? 相关理论;;感谢您的观看。;内容总结
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