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考纲要求;;①不能转录为信使RNA,不能编码蛋白质。;;真核细胞的 基因结构;原核细胞的基因结构;; 区分:启动子与起始密码 ; 区分:终止子与终止密码 ;基因工程的概念;;基因工程的基本内容;1.1 基因操作的工具;1、限制性核酸内切酶(限制酶);(4)来源:主要从原核生物中分离
原因:限制酶是在生物体(主要是微生物)内的一种酶,能将外来的DNA切断,对自己DNA无害,保护细胞原有遗传信息,由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的,故名限制性内切酶。
(真核生物一般有其他保护措施)
注意:限制酶是指一类酶,而不是一种酶。 ;(5)作用结果:形成DNA片段末端;; DNA被限制酶切断后有两个反向互补的“黏性末端”。被同一种限制酶切断的几个DNA具有相同的黏性末端,能够通过互补进行配对。;什么叫黏性末端?;讨论1.要想获得某个特定性状的基因必须要???限制酶切几个切口?可产生几个黏性末端?;;(3)常用种类:;(4)与DNA聚合酶的比较;;运载体;1.2 基因工程的基本操作程序;一、目的基因的获取;(1)从基因文库中获取目的基因;① 概念:PCR全称为_______________,是一项
在生物_____复制______________的核酸合成技术 ;⑥过程:;1.用一定的_________切割
质粒,使其出现一个切
口,露出____________。
2.用_____________切断目
的基因,使其产生_____
____________。;;5.基因表达载体的组成:;复制原点:DNA的复制有特定的起始位点。
启动子:位于基因的首端的一段特殊的DNA片断,它是RNA聚合酶识别和结合的部位,启动转录。
终止子:位于基因的尾端的一段特殊的DNA片断,能终止mRNA的转录。
标记基因:作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因,从而将有目的基因的细胞筛选出来.;;不同限制酶切位点的连接;三、将目的基因导入受体细胞;1、将目的基因导入植物细胞的方法:农杆菌转化法
(1)农杆菌:
(2)原理及适用范围:;2、将目的基因导入动物细胞
(1)方法:显微注射法
(2)程序:载体提纯-取卵-显微注射-早期胚胎培养-胚胎移植-发育
;四、目的基因的检测与鉴定;DNA分子杂交示意图 ;1)以下说法正确的是
A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列
B、质粒是基因工程中唯一的运载体
C、运载体必须具备的条件之一是:具有多个限制酶切点,以便与外源基因连接
D、基因控制的性状都能在后代表现出来;3)有关基因工程的叙述中,错误的是( )
A、DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来
B、 限制性内切酶用于目的基因的获得
C、目的基因须由运载体导入受体细胞
D、 人工合成目的基因不用限制性内切酶;5)基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中,不进行碱基互补配对的步骤是
A、人工合成目的基因
B、目的基因与运载体结合
C、将目的基因导入受体细胞
D、目的基因的检测和表达;(2006年江苏卷15题)我国科学家运用基因工程技术,将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞并成功表达,培育出了抗虫棉。下列叙述不正确的是
A.基因非编码区对于抗虫基因在棉花细胞中的表达不可缺少
B.重组DNA分子中增加一个碱基对,不一定导致毒蛋白的毒性丧失
C.抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递到近缘作物,从而造成基因污染
D.转基因棉花是否具有抗虫特性是通过检测棉花对抗生素抗性来确定的
;(2006年全国卷Ⅰ5题)采用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵,培育出了转基因羊。但是,人凝血因子只存在于该转基因羊的乳汁中。以下有关叙述,正确的是
A.人体细胞中凝血因子基因编码区的碱基对数目,等于凝血因子氨基酸数目的3倍
B.可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入羊的受精卵
C.在该转基因样中,人凝血因子基因存在于乳腺细胞,而不存在于其他体细胞中
D.人凝血因子基因开始转录后,DNA连接酶以DNA分子的一条链为模板合成mRNA
;(2006年四川卷4题)基因工程技术可使大肠杆菌合成人的蛋白质。下列叙述不正确的是
A.常用相同的限制性内切酶处理目的基因和质粒
B.DNA连接酶和RNA聚合酶是构建重组质粒必需的工具酶
C.可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒
D.导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达;(2006年江苏卷41题)基因工程又叫基因拼接
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