分子生物学常用技术 核酸分子杂交技术 分子生物学.pptx

核酸分子杂交技术主讲人:XXX01核酸分子杂交的定义和基本原理02核酸探针目 录03分子杂交的类型及主要步骤04核酸分子杂交条件的优化01核酸分子杂交的定义和基本原理核酸分子杂交的定义和基本原理定义· 单链的核酸分子在合适的条件下，与具有碱基互补序列的异源核酸 形成双链杂交体的过程称分子杂交。· 利用核酸分子杂交检测靶序列的一类技术称核酸分子杂交技术。 核酸分子杂交的定义和基本原理基本原理DNA链与DNA链、DNA与RNA链、RNA与RNA链之间，只要具有一定的互补碱基序列就可以在适当的条件下相互结合形成双链，用已知的DNA或RNA片段来检测未知的DNA或RNA片段。DNADNARNARNA02核酸探针核酸探针定义是指能与特定的靶核酸序列（DNA或RNA）发生碱基互补结合，并被标记且可采用某些特殊的方法检测出来已知序列的核酸分子。核酸探针基因组DNA探针cDNA探针1分类324RNA探针寡核苷酸探针核酸探针基因组DNA探针DNA探针是最常用的核酸探针，多为某一基因的全部或部分序列，或某一非编码序列。这些DNA片段是特异的，如细菌的毒力因子基因探针和人类Alu探针。核酸探针cDNA探针是以mRNA为模板经过逆转录酶催化产生的互补于mRNA的DNA链。 DNA探针优点 cDNA探针（1）制备方法简便，常克隆在质粒载体中，可以无限繁殖；（2）不易降解；（3）标记方法较成熟。核酸探针R