基因工程导论.pptVIP

质粒载体 质粒是细菌染色体外小型双链环状DNA。质粒DNA在细菌中的复制有两种类型，即严紧型和松驰型，后者为高拷贝质粒，常用于基因克隆实验。常用的质粒载体有pBR322，pUC18和pUC19。 第三十一页，共八十页，2022年，8月28日 第三十二页，共八十页，2022年，8月28日 第三十三页，共八十页，2022年，8月28日 噬菌体载体 ?-噬菌体载体：?gt10、 ?gt11、EMBL4、粘粒载体 M-13噬菌体载体 T4噬菌体载体 第三十四页，共八十页，2022年，8月28日 ?噬菌体载体 插入载体(Subsitution vector) : ?gt10和?gt11，只有单一的EcoRⅠ酶切位点，只容许几个kB的外源DNA插入。此类载体主要同于cDNA文库的构建。 替代载体（replace vector)：EMBL4，含有EcoRⅠ(E) 、 SalⅠ(S) 和BamHⅠ(B)三个限制性内切酶位点。酶切后可用外源性DNA取代。指入片段长度为9-22kb。主要用于构建基因组文库。 第三十五页，共八十页，2022年，8月28日 第三十六页，共八十页，2022年，8月28日 第三十七页，共八十页，2022年，8月28日 第三十八页，共八十页，2022年，8月28日 M13噬菌体载体 M13噬菌体含约64kb的单链闭环DNA分子。在菌细胞内形成过度阶段