叶绿体中色素的提取和分离【知识精讲+备课精研】 高一生物 精讲课件（沪科版第一册）.pptxVIP

实验4.3 叶绿体中色素的提取和分离 叶绿体中色素的提取和分离实验目的 掌握提取和分离叶绿体中色素的方法，探究叶绿体中色素的种类。实验材料新鲜的绿色叶片(如菠菜叶片)。叶绿体中色素的提取和分离实验原理 叶绿体中含有两大类色素（叶绿素和类胡萝卜素），它们溶于有机溶剂，因此可选用乙醇或丙酮进行提取。 层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂。叶绿体内的色素在层析液中的溶解度各不相同，溶解度越高，在滤纸上的扩散速度越快，反之则慢，从而可以将叶绿体中的色素分离开来。因此，可采用纸层析法进行分离。 实验材料、用具： 1.材料：新鲜的绿色叶片(如菠菜叶片)。2.仪器：干燥的定性滤纸，烧杯(100mL)，研钵，玻璃漏斗，尼龙布（或脱脂棉），毛细吸管，剪刀，小试管，培养皿，药匙，量筒(10mL)，天平，镊子，铅笔，尺子。 3.药品：丙酮，层析液，二氧化硅，碳酸钙。 实验过程： （1）称取约5克的菠菜绿叶，剪碎，放入研钵中。（2）研钵中加入少许二氧化硅和碳酸钙，再加入5mL的丙酮。（3）迅速研磨。（4）将研磨液迅速倒入玻璃漏斗中进行过滤，将过滤液收集到试管中。2.分离色素的步骤 ①制备滤纸条：将预备在试验桌上的滤纸条一端剪去两个角作标记，在距离这一端1cm处用铅笔画一条细的横线。②画滤液细线：用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线轻轻均匀地画一道线，每次划完尽量吹干，用提取液反复划好几次，不要弄破纸条。③层析分离叶绿体中的色素：将4mL层析液倒入烧杯中，然后将滤纸条画有滤液细线的一端置于烧杯中的层析液中，注意千万不要将滤液细线浸没在层析液中。④（干燥后）观察实验结果：出现四条色素带，颜色从上往下分别是橙黄色、黄色、蓝绿色和黄绿色，四种色素分别是胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a和叶绿素b。叶绿体中色素的提取和分离实验结果胡萝卜素（橙黄色）绿叶中的色素类胡萝卜素（含量约1/4）叶黄素（黄色）叶绿素a（蓝绿色）叶绿素（含量约3/4）叶绿素b（黄绿色）问题讨论： 1.加入SiO2、CaCO3的作用是什么？ 二氧化硅的作用是使研磨更加充分、迅速；碳酸钙的作用是保护叶绿素不分解。2.将滤液放在试管中，为什么要及时用棉塞将试管塞严？ 滤液中含有丙酮，丙酮有毒，这样做是为了防止其挥发。 3.画滤液细线时重复画几次的目的是什么？ 增加色素的含量，使分离后的色素带更加清晰。4.为什么不能让滤液细线触及层析液？ 层析液会溶解色素，使色素无法分离。5.观察实验结果有什么现象？滤纸条上出现了几条色素带？每条色素带的颜色和排序如何？ 滤纸条上将分离出四条色素带，颜色从上往下分别是橙黄色、黄色、蓝绿色和黄绿色，四种色素分别是胡萝卜素（最快）、叶黄素、叶绿素a（最多）和叶绿素b（最慢）。 实验关键：1.选材时应注意选择鲜嫩、色浓绿、无浆汁的叶片(如菠菜叶)。2.画滤液细线时应以细、齐、直为标准，重复画线时必须等上次画线干燥后再进行，重复2-3次。3.层析时不要让滤液细线触及层析液。谢 谢