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- 2023-04-09 发布于四川
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培养基的配制、分装和灭菌;二. 实验材料;(一)培养基的制备
(1)培养基是人工按一定比例配制的供微生物生长繁殖和合
成代谢产物所需要的营养物质的混合物。培养基的原材
料可分为碳源、氮源、无机盐、生长因素和水。根据微
生物的种类和实验目的不同,培养基也有不同的种类和
配制方法。
(2)制备流程:
称量→溶解→蒸煮→调pH→分装→包扎→灭菌; (3)操作步骤:
1)称药品 按实际用量计算后,按配方称取各种药品放入大烧杯中。牛肉膏可放在小烧杯或表面皿中称量,用热水溶解后倒入大烧杯;也可放在称量纸上称量,随后放人热水中,牛肉膏便与称量纸分离,立即取出纸片。蛋白胨极易吸潮,故称量时要迅速。
2)加热溶解 在烧杯中加入少于所需要的水量,小火加热,并用玻棒搅拌,待药品完全溶解后再补充水分至所需量。若配制固体培养基,则将称好的琼脂放入已溶解的药品中,再加热融化,此过程中需不断搅拌,以防琼脂糊底或溢出,最后补足所失的水分。 ;
3)调pH 检测培养基的pH,若pH偏酸,可滴加1滴1mol?L-1NaOH,边加边搅拌,并随时用pH试纸检测,直至达到所需pH范围。若偏碱,则用1mol?L-1HCl进行调节。pH的调节通常放在加琼脂之前。应注意pH值不要调过头,以免回调而影响培养基内各离子的浓度。
4)过滤 液体培养基可用滤纸过滤,固体培养基可用
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