常用生物化学检验技术.pptVIP

2.pH 缓冲液pH决定了蛋白质的带电状态，电泳时应选择一个合适pH，使各种蛋白质在这一pH时净电荷差别最大以利于分离。血清蛋白醋酸纤维薄膜电晕常用pH8.6的巴比妥缓冲液。各种蛋白质均带负电荷，电泳时向正极移动。 缓冲液pH的计算 pH=pKa +lg([盐]/[酸]) 电泳过程水会发生电离。 正极：2OH－→ H2O ＋1/2O2↑＋2e pH↓ 负极：2H＋＋2e→H2↑ pH↑ 故电泳2～4次后应将缓冲液正极交换，减少这种影响。 第六十二页，共一百二十页。 3.离子强度 是指溶液中各种离子的摩尔浓度（Ci）与其电荷数平方（Zi 2）乘积总和的1/2。即 　 I=1/2∑CiZi 2 I的单位是mol/L。 如0.1mol/L NaCL I=0.1mol/L 0.2mol/LMgCL2 I=0.6mol/L 对于缓冲液I计算，由于弱酸的电离度很低，一般只计算盐的。 第六十三页，共一百二十页。 I愈大，缓冲能力越大，pH越稳定，但缓冲液所载分电流增加，样品所栽的电流减少，