光合细菌培养基.docxVIP

红螺菌培养基： 1、富集培养基： 经典的紫色非硫细菌（红螺菌）的富集培养基的配方为： NH4Cl：0.1g ； NaHCO 3：0.1g ；K2HPO 4：0.02g ；CH3COONa ：0.1~0.5g ；MgSO 4· 7H2O： 0.02g ； NaCl ：0.05 ～0.2g ； 生长因子 1ml，蒸馏水 97ml ，微量元素溶液 1ml，pH 为 7.0 。 其中，①5％ NaHCO 3 水溶液，过滤除菌取 2m1 加入无菌培养基中。②生 长因子：维生素 B10.001mg 、乙尼克丁酸 0.1mg 、对氨基苯甲酸 0.1mg 、生 物素 0.001mg ，以上药品溶于蒸馏水中，定容至 10ml ，然后过滤除菌。③ 微量元素溶液： FeCl ·6H 3 O ：5mg；CuS0 2 ·5H 4 O：0.05mg ；H BO 2 3 lmg； 4 MnCl ·4H 2 O：0.05mg ；ZnSO 2 ·7H 4 O：1mg；Co(NO 2 ) ·6H 3 2 O： 0.5mg 。以上药 2 品分别溶于蒸馏水中，并定容至 1000m1 。 除①、②、③外，各成分溶解后 100 Pa 灭菌 20min 。然后分别加入①、 ②、③，如加入 0.1 ％～ 0.3 ％的蛋白胨则能促进该菌生长。2、分离培养基： 传统的红螺科分离培养基的配方为： NH Cl：0.1g ； MgCl 4 ：0.02g ； 酵 2 母膏： 0.01g ； K HPO 2 ：0.05g ； NaCl ： 0.2g ； 琼脂 2g，蒸馏水 90ml 。 4 100Pa 灭菌 20min 。 灭菌后，无菌操作加入经过滤除菌的 0.5g/5mlNaHCO  ，再无菌加入过 3 滤除菌的 0.1g 或 0.1mlNa S·9H 2 O（降低培养基的氧化还原值），最后再加 2 入 5ml 经过滤除菌的乙醇、戊醇或 4％丙氨酸。用过滤灭菌的 0.1mol/H PO 3 3 调 pH 至 7.0 。 摘自百度知道。 筛选富集培养基为: NH4Cl 1g/L, NaHCO3 1g/L, CH3COONa 3g/L, KH2PO4 0.3g/L, MgSO4 0.1g/L, 酵母膏 0.5g/L, 微量元素母液 1g, 自然 pH 值。扩大培养培养基以海水代替微量元素母液。1000~4000lx 光照, (30±2)℃恒温培养。 参考文献：固定化海洋光合细菌处理生活污水的研究 * 黄宝兴,李兰生,赵亮,张微,唐迎迎海洋湖沼通报 基础培养基:NH4Cl:1g; Na2HPO4: 0.5g; MgSO4: 0.2g; NaCl: 2g; NaHCO 3: 5g; 酵母膏:2g ; 乙醇 2ml，用 0.1N H3PO4 调至 pH7.0。 划线培养基:采用固体琼脂培养基，即在基础培养基的基础上添加1.0%的琼脂。 以上培养基初始 pH 值均用 H3PO4 调至 7.0，经 121℃灭菌 30 分钟，NaHCO3 过滤除菌后加入。培养条件:光照培养箱温度控制在 30℃、光照强度控制在 3000uE.m-2s-1 培养。光合细菌是一种兼性嫌气细菌，需要深层培养或在真空干燥器内达到嫌气或半嫌气状态，一般将混合菌放入培养液中先富集再分离。具体方法:将混合菌装入 10ml 试管中，加入培养 液充满至刻度，盖上胶塞，在光照条件下保持在 30℃左右培养。待培养液出现红色后，取培养液加 1.5%的琼脂，制成固体培养基，取菌液分别用无菌水以10-100000000 倍稀释，分别取 lml 样本涂在平皿上，光照、30℃培养 2d 左右在平板上长出菌落。移至平板采用划线法进行分离，将划好线的平板倒置，在相同条件下培养，反复分离纯化，挑取不同特征的菌落，用斜面保存，纯化分离后的菌种置于冰箱保存备用。 PSB 培养中除碳、氮、磷等主要营养元素外，还需要一定量的镁、钙、钠和有关的微量元素，将所需的营养元素按一定的比例配成适于菌体生长繁殖的培养基。本实验室采用酵 42母膏、蛋白胨培养基，基本配方为:CaCl2 0.3g，MgSO ·7H 4 2 O 0.5g，酵母膏3g，蛋白胨 3g， 参考文献：蒸馏水 1000ml，pH: 6.8. 如需制固体培养基再加 2%琼脂。培养温度：25℃～30℃最佳，光照强度：2000LX～5000LX，PH：7.5～8.5 最佳。 参考文献： 把菌种接种到灭好菌的培养基中，在三角瓶中进行二级培养，每天摇晃几次。把 40L 的反应器中加满自来水，放入通气管，盖上保鲜膜一起用次氯酸杀菌消毒24 小时，用硫代硫酸钠（1L 次氯酸需要 150g 硫代硫酸钠）来中和。以15%的接种量接入反应器中，用泵通气培养，用分光光度计跟踪测量菌液的