临床微生物检验流程标准化培训班课件 7-王贺-真菌行标解读及经验分享.pdfVIP

《侵袭性真菌病临床实验室诊断操作规范》 解读和经验分享 北京协和医院检验科 • 起草单位：中国医学科 学院北京协和医院、北 京大学第一医院、复旦 大学附属华山医院 • 起草人：徐英春、李若 瑜、章强强、王瑶、王 贺、余进、郭莉娜、张 丽、范欣。 • 本标准适用于具有II级生 物安全防护能力的临床 实验室。 侵袭性真菌病 invasive fungal disease ，IFD • 真菌侵入人体组织、血液，并在其中生长 繁殖所致组织损害、器官功能障碍、炎症 反应的病理改变及病理生理过程。 • 根据患者宿主因素、临床特征和微生物学 检查、将IFD诊断分为确诊、拟诊和疑似。 内容 • 标本采集处理 • 标本形态检查 • 培养检查 • 真菌培养鉴定 • 非培养诊断方法 • 药物敏感试验 血培养标准采集流程 • 第一步：用皂液和流动 水/含酒精快速手消进行 手卫生 • 第二步：用酒精纱布消 毒培养瓶塞，充分待干 血培养标准采集流程 • 第三步：穿刺部位皮肤消毒 • 三步法 – 70%乙醇擦拭静脉穿刺部位，作用30s 以 上、待干； – 1%-2%碘酊从穿刺点向外画圈消毒至消 毒区域直径3cm，作用30 s或10 %碘伏 作用60 s； – 70 %乙醇脱碘：对碘过敏者，用70% 乙 醇消毒60s，待乙醇挥发干燥、采集标本 • 一步法 – 葡萄糖酸氯己啶作用30s，或70%异丙醇 消毒后自然干燥，但不适用于2个月以内 的新生儿。 血培养标准采集流程 • 第四步：戴手套 • 如需对穿刺部位进行触诊，戴 无菌手套 • 如无需对穿刺部位进行触诊， 戴非无菌手套 血培养标准采集流程 • 第五步：抽血 • 至少采集2套。 • 标本与培养基比例为 1/10~1/5 （成人每瓶 8ml~10ml ） • 应包括需氧瓶或真菌瓶 血培养标准采集流程 • 第五步：抽血 • 宜在抗真菌药物使用前，发热初期或寒 颤期采静脉血或骨髓液 • 至少采集2套 • 标本与培养基比例为1/10~1/5 （成人每 瓶8ml~10ml ） • 应包括需氧瓶或真菌瓶 血培养标准采集流程 • 第六步：混匀 • 血标本接种到培养瓶后，轻 轻颠倒混匀以防血液凝固 （不要大力摇晃） • 抽取导管血和外周血以诊断 导管相关性血流感染，标记 抽血部位和抽血时间尤为重 要 血培养标准采集流程 • 第七步：从另一部位穿刺 采集第二套血培养，方法 同前 血培养标准采集流程 第八步：送检 • 2h 内常温送检。若不能及时送检，则常温保存 • 不得冷藏或冷冻 标本采集处理-血液 • 评估导管相关性血流感染（CRBSI ） – 如患者已拔管，应采集2套外周血进行培养，同 时做导管尖Maki法半定量培养（导管尖长 5cm ），如1套及以上外周血培养阳性，导管尖 培养阳性（≥15 CFU ），且血培养与导管尖培养 菌种相同，即为CRBSI 标本采集处理-血液 • 评估导管相关性血流感染（CRBSI ） – 如患者尚未拔管，应至少采集1套外周血培养， 同时尽快采集等量的导管血进行培养， • 如导管血与外周血培养均阳性，导管血阳性 时间比外周血早2h，或导管血中菌量为外周 血中菌量5倍以上，且没有其它明确感染源， 即为CRBSI ； • 如导管血培养阴性，外周血培养阳性且为念 珠菌属，且没有其它明确感染源，也可能为 CRBSI 。 标本采集处理-骨髓