临床微生物检验流程标准化培训班课件 6--吕火烊-脑脊液及无菌体液培养操作规范.pdf

脑脊液及无菌体液培养操作规范 检验中心 吕火烊 lab_lhx@126.com 目录 • 脑脊液培养操作规范 • 无菌体液培养操作规范 （除外血液、脑脊液和尿菌） 脑脊液培养操作规范 • 脑脊液培养意义 确定感染性脑膜炎中的病原体； 提供抗菌药物选择的依据； 评价抗感染治疗的疗效。 • 提高脑脊液培养准确性的难点 临床送检样本体积相对较少 3 脑脊液中微生物含量较低（10 cfu/ml ） 操作不当污染不可避免 引起急性脑膜炎的普通细菌 新生儿 • 大肠埃希菌、无乳链球菌(B群 链球菌) 、单核细胞李斯特菌 ＜2个月 • 无乳链球菌、单核细胞李斯特 菌、大肠埃希菌 ＜10岁 • 流感嗜血杆菌、肺炎链球菌、 脑膜炎奈瑟菌 引起急性脑膜炎的普通细菌 • 脑膜炎奈瑟菌 青少年 • 肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟菌 成人 • 肺炎链球菌、革兰阴性杆菌、单核细胞李斯特菌 老年人 • CoNS、金黄色葡萄球菌、棒状杆菌属、痤疮丙酸 中枢神经系 统分流术后 杆菌、需氧革兰阴性杆菌、其它厌氧菌 感染/脑室炎 可引起中枢系统感染的其他病原体 病毒：单纯疱疹病毒、肠道病毒、西尼罗病 毒等 细菌：结核分枝杆菌、诺卡菌属、支原体、 柔氏螺旋体、埃立克体属等 真菌：新型隐球菌、球霉菌属和荚膜组织胞 浆菌等 原虫：棘阿米巴原虫 脑脊液培养对样本采集的要求 • 腰椎穿刺或Ommaya储液囊液体或脑室引流 液 （医生操作） • 至少采集3管，要求每管：≥3.0 ml 第1管：生化常规（总蛋白、葡萄糖等） 第2管：微生物学（培养、涂片、PCR ） 第3管：血液学（细胞计数等） 脑脊液培养对样本量的要求 • 成人与儿童 细菌培养+涂片革兰染色：≥1.0 ml 病毒培养：≥0.5 ml 隐球菌抗原+墨汁染色：≥1.0 ml 真菌培养+荧光染色：≥3.0 ml （疑似慢性脑膜炎的患者，为明确排除真菌感染，需要提供多达3管单独的脑脊液 样本用于真菌培养。） AFB培养+抗酸染色：≥3.0 ml （疑似慢性脑膜炎的患者，为明确排除AFB感染，需要提供多达3管单独 的脑脊液样本用于AFB培养。） 脑脊液培养对样本量的要求 • 成人与儿童 （特殊病原体） 亚急性海绵状脑病(14-3-3蛋白) ：≥3.0 ml 病毒PCR ：≥1.0 ml 西尼罗病毒：≥1.0 ml 棘阿米巴原虫：≥10.0 ml 厌氧培养+革兰染色：≥1.0 ml 脑脊液培养对样本量的要求 • 新生儿 细菌培养+涂片革兰染色：≥0.5 ml 病毒培养：≥0.2 ml 培养样本采样后均应即时送检 培养基及培养环境要求 1.常规细菌培养 • 培养基：哥伦比亚血琼脂平板、巧克力平板；巯基乙酸肉 汤（或儿童血培养瓶） • 培养环境：35-37℃，5-8%CO2气体，培养48-96小时 2.厌氧菌培养 • 培养基：布氏血琼脂平板、厌氧血培养基（瓶） • 培养环境：35-37℃，厌氧环境，培养至7天 3.真菌培养 • 培养基：沙保弱琼脂平板、儿童血培养瓶 • 培养环境：28-30℃，空气、湿度不小于70%，培养至7天 脑脊液细菌培养的处理 样本量极少 （﹤0.2 ml ） 与临床沟通，优先检测最需要的项目 其他部门无法