分子生物学8DNA重组技术.pptxVIP

分子生物学8DNA重组技术; ; ;第一节 工具酶;一、限制性核酸内切酶 （restriction endonucleases）;(一)限制酶的命名与分类;(二) Ⅱ型限制酶的识别和切割位点;如EcoRI切割后产生5′末端突出的粘性末端； 5′－G↓AATT C－3′ 5′－G 5′ AATTC－3′ 3′－C TTAA↑G－5′ 3′－CTTAA 5′ G－5′ PstI切割后产生3′末端突出的粘性末端： 5′－C TGCA↓G－3′ 5′－CTGCA G－3′ 3′－G↑ACGT C－5′ 3′－G ACGTC－5′ 还有一些酶沿对称轴切割DNA，产生平端或钝端（blunt end）。如SmaI: 5′－CCC↓GGG－3′ 5′－CCC GGG－3′ 3′－GGG↑CCC－5′ 3′－GGG CCC－5′ 有些限制酶识别序列不同，但切割DNA后产生相同类型的粘性末端，这些酶称为同尾酶（isoaudamers），如BamHI（G↓GATCC）和Sau3AI（N↓GATCN）。由此产生的粘性末端称为配伍末端（compatible end），可进行相互连接，在DNA重组中