克隆基因表达及基因干扰修 (1).pptxVIP

第1页/共101页克隆基因表达及基因干扰修 (1)第2页/共101页克隆基因的表达及基因干扰第3页/共101页克隆基因的表达及基因干扰第一节 外源基因的表达第二节 表达产物的分离、纯化与鉴定第三节 基因表达干扰技术第4页/共101页克隆基因的表达及基因干扰第一节 外源基因的表达第二节 表达产物的分离、纯化与鉴定第三节 基因表达干扰技术第5页/共101页第一节 外源基因的表达基因表达遗传信息从DNA到蛋白质的传递过程——中心法则（central dogma）。 第6页/共101页第一节 外源基因的表达克隆基因表达外源基因在宿主细胞中表达。导入宿主细胞外源基因重组载体表达载体在宿主细胞中 表达出蛋白质提取蛋白宿主细胞：原核细胞或真核细胞。第7页/共101页第一节 外源基因的表达一、原核生物表达体系二、真核生物表达体系 酵母，哺乳动物细胞大肠杆菌第8页/共101页一、原核生物表达体系（一）对外源目的基因的要求（二）原核表达载体具有的特点（三）真核生物基因在原核细胞中的表达（四）包涵体第9页/共101页一、原核生物表达体系（一）对外源目的基因的要求 1、不应具有5′端非编码区以及内含子结构 2、不能直接用真核基因组DNA. 3、常以cDNA为模板，设计引物，PCR扩增目的基因. 第10页/共101页一、原核生物表达体系（二）原核表达载体具有的特点 选择标志 启动子 ：