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分子生物学硕士;;;;;;;;;（1）变性 即打开DNA双螺旋结构，变成单链DNA的过程。 变性的方法有：加热变性 有机溶剂变性 高浓度盐变性 碱变性等 常用方法是加热变性和碱变性。 DNA变性时，在260nm处的紫外吸光度增加，这种现象又称 增色效应。当增色效应达到最大值的50%时温度，称熔解温度 （melting temperature Tm值），Tm值表明DNA溶液中一半的 DNA双链已解离为单链，也就是说，Tm值反映了DNA变性的程度 和难易，Tm值越大，变性越难，反之，变性容易。; 大多数DNA的Tm值在85～90℃左右。但Tm值并不是一个固定常数，常受许多因素影响。 ①DNA的碱基组成。A：T碱基对只有两个氢链，而G：C碱基对有3个氢键。因此Tm值主要受G：C碱基对数量多少的影响，有一个经验公式为： Tm＝(G+C)%×0.41＋69.3 ②溶液的离子强度。DNA链上的磷酸基团带负电荷，它们之间的静电具有相互排斥作用，可导致DNA双链结构的不稳定，比如：在无盐的水中，DNA在室温条件下