碱性磷酸酶km值测定.pptxVIP

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酶促反应动力学研究方法介绍;实验目的 学习环境因素对酶促反应速度的影响; 学习米氏方程及Km值得测定; 测量碱性磷酸酶km值; 实验原理 E的反应速度受到环境因素的影响,这些因素包 括底物浓度、E浓度、PH、温度、激活剂、抑止剂等;(一)米-曼氏方程式;;当反应速度为最大反应速度一半时;(二)Km与Vmax的意义; Vmax 定义:Vm是酶完全被底物饱和时的反应速度,与酶浓度成正比。;(三)Km值与Vmax值的测定;2. Hanes作图法;酶浓度对反应速度的影响;双重影响 温度升高,酶促反应速度升高;由于酶的本质是蛋白质,温度升高,可引起酶的变性,从而反应速度降低 。 ;pH对反应速度的影响;碱性磷酸酶km值的测定;操作;实验数据及结果;实验讨论; 现有某待测样品液5ml,将其稀释到100ml,取其稀释液1ml加入测定管按酚试剂法测其蛋白质含量,另取已知浓度的牛血清白蛋白溶液(250微克/ml)1ml加入标准管,其余操作同测定管。反应显色后测得吸光度分别为:A测=0.4,A标=0.25,求原样品液中的蛋白质含量(g/100ml) 0.8;

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