鲈鱼PPARγ启动子的克隆[设计+开题+综述].pdfVIP

开题报告 海洋生物资源与环境 鲈鱼的PPARγ启动子基因克隆 一、选题的背景与意义 核受体超家族是转录因子中最大的一个家族。过氧化物酶体增殖物激活受体 (peroxisomeproliferators—activatedreceptor，PPAR)是一类由配体激活的核转录因子， 属于核内受体超家族成员。1990 年，在啮齿类动物的肝脏中克隆出过氧化物酶体增值物激 活受体 PPARａ后，紧接着克隆出了其同源基因PPARβ及PPARγ ，从此掀起了研究PPAR 基因的热潮。近年来，有关PPAR 的多态性的研究十分活跃，提高了PPAR 的生物学地位及其 在人类疾病中作用的认识。有关PPAR的多态性的研究十分活跃，提高了PPAR的生物学地位 及其在人类疾病中作用的认识。 过氧化物酶体增殖剂活化受体γ（PPARγ)是一个由配体激活的核转录因子属于核激素 受体（nuclearhormonereceptor）超家族。被激动剂激活以后。该受体可以促进葡萄糖的 利用以及胰岛素的增敏。激动剂成为一类全新的型糖尿病治疗药物。前人们正致力于探讨 干预PPARγ基因转录和影响PPARγ蛋白功能的药物及其作用机制，若能全面地揭示PPARγ 功能，则将对肥胖、糖尿病、肿瘤等疾病的治疗大有益处。 近年来有关PPAR多态性的研究成果层出不穷，提高了我们对PPAR生物学地位及其在人 类疾病中作用的认识。PPAR在多种疾病发生发展过程中有着重要作用。目前认为PPAR 的常 见多态性影响胰腺B细胞功能，导致胰岛素分泌周组织对胰岛素敏感性的改变。它与2型糖 尿病、肥胖、心血管疾病等发病风险相关联，其多态性的效应可被遗传和环境因素修饰，如 肥胖、种族、遗传背景等。但是，各种突变在不同人群的研究结果不一致，可能是由基因互 作及基因与环境的相互作用有关。 总之从遗传学角度去探讨这些疾病的发病机制，研究干预PPAR基因转录的药物，将会 从基因水平对这些疾病的诊断、预防和治疗带来新的突破。 二、研究的基本内容与拟解决的主要问题： （一）研究的基本内容： 1.鲈鱼的PPARγ启动子基因克隆 （二）拟解决的问题： 1..鲈鱼的PPARγ启动子基因的引物设计。 2.掌握 PCR 及其他分子的克隆的方法 三、研究的方法与技术路线： 1、鲈鱼DNA 的提取 2、根据已知的mRNA 序列，设计克隆启动子的引物 3、 PCR 跑电泳 4、连化 42°C 热激，90S，1h 摇匀 5、选阳性克隆 6、序列测序 7、去NCBI 进行对比 鲈鱼 DNA 的提取 ↓ 根据已知的 mRNA 序列， 设计克隆启动子的引物 ↓ PCR 跑电泳 ↓ 连化 42°C 热激，90S， 1h 摇匀 ↓ 选阳性克隆 ↓ 序列测 ↓ 去NCBI 进行对比 四、研究的总体安排与进度： 2010.11--2010.12 毕业论文选题，进行文献查阅和资料收集 2010.12--2010.1 制定具体研究计划和试验方案，完成开题答辩与综述。 2010.1--2010.4 完成实验 2010.4--2010.5 数据和材料整理.分析.总结 2010.5--2010.6 论文撰写, 提交并答辩 五、参考文献: [1 陈刚, 罗敏, 丁伟, 等瘦素受体基因变异与中国人肥胖的关系[J].