《细胞生物学实验》基本技术培训 教学课件.pptxVIP

超净台使用基本技术 超净工作台 超净台是一种局部净化设备，可以通过紫外线杀菌和连续气流通过，造就局部高清洁度的空气环境。是科研制药、医疗卫生、电子光学仪器等行业的专用设备。目前为细胞无菌培养所必需。 紫外线杀菌原理： 1.细菌吸收紫外线后，引起DNA链断裂，造成核酸和蛋白的交联破裂，杀灭核酸的生物活性，致细菌死亡。2.紫外线照射使蛋白质变性，细菌丧失代谢能力，导致细菌死亡。连续气流通过： 将空气通过由特制的微孔泡沫塑料片层叠合组成的“超级滤清器”后吹送出来，形成连续不断的无尘无菌的超净空气层流，即所谓“高效的特殊空气”，它除去了大于0.3μm的尘埃、真菌和细菌孢子等等。超净空气的流速为24-30ｍ／min，这已足够防止附近空气可能袭扰而引起的污染，这样的流速也不会妨碍采用酒精灯或本生灯对器械等的灼烧消毒。 超净台使用前1.用酒精棉球擦拭台面2.开启紫外线照射灭菌30分钟3.开启风机4.关闭紫外线，开启照明灯5.点燃酒精灯6.用酒精棉球擦拭双手消毒7.进行无菌操作 超净台使用后1.操作完成后，熄灭酒精灯2.清理台面物品，倾倒废液缸3.用酒精棉球擦拭台面4.开启紫外线灭菌30分钟后关闭5.写好使用记录 倒置显微镜使用基本技术 倒置显微镜 倒置显微镜组成和普通显微镜一样，只不过物镜与照明系统颠倒，在载物台之下。用于观察培养的活细胞，具有相差物镜，显示效果较好。目镜电源开关光源旋钮载物台粗调旋钮微调旋钮物镜盘 倒置显微镜使用前1.插上电源线2.入座，打开电源开关3.旋开光源旋钮至合适亮度4.调整目镜至合适瞳距 使用倒置显微镜的观察1.将待观察细胞容器置于载物台正中2.切换物镜至最低倍数，在目镜下观察 细胞3.调节粗调旋钮，使焦距对准细胞4.调节微调旋钮，达到最佳观测效果5.切换较高倍数的物镜以获得更好的放大效果 倒置显微镜使用后1.观察结束后，取下细胞容器2.用酒精棉球擦拭载物台面3.将物镜切换至最低倍数4.将光源旋钮旋至最低5.关闭显微镜开关6.拔掉电源7.写好仪器使用记录 二氧化碳培养箱使用基本技术 二氧化碳培养箱 二氧化碳培养箱是通过在培养箱箱体内模拟形成一个类似细胞和组织在生物体内的生长环境，如稳定的温度（37℃）、稳定的CO2水平（5%）、较高的相对饱和湿度（95%），来对细胞和组织进行体外培养的一种装置。 培养箱的设置1.培养箱要放置于洁净房间2.以通气管连接培养箱和二氧化碳钢瓶3.开启钢瓶阀门，调节至适当的压力4.打开培养箱电源开关5.设定温度为37℃，二氧化碳浓度为5%6.箱底水盘中注入适量无菌水 培养箱的使用1.放入和拿取细胞容器时先开培养箱门2.再打开第二层玻璃门3.放入的细胞容器要保持洁净无菌4.尽量减少开箱门的频率5.关闭培养箱门和玻璃门时要严密 切片机使用基本技术 石蜡切片机切片机是制作供显微镜观察用的切片的装置。切片机是切制薄而均匀组织片的机械，组织用坚硬的石蜡或其他物质支持，每切一次借切片厚度器自动向前（向刀的方向）推进所需距离，厚度器的梯度通常为1微米。切制石蜡包埋的组织时，由于与前一张切片的蜡边粘着，而制成多张切片的切片条。。 切片机使用操作步骤1.将切片刀退至滑道末端固定（防止上蜡块时划到手）；2.将粘有蜡块的台木固定在切片机上；3.调整刀片的位置，使刀片与蜡块表面以最小距离接触；4.根据要求调整切片厚度；5.以均匀的速度进行切片；6.将切好的蜡带取走；7.切片刀退至滑道末端固定，取下蜡块；8.收拾好切片机上及台面上多余的蜡带；9.填写使用记录。