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仪器分析毛细管电泳;5.1 毛细管电泳的基本原理;经典电泳分析;高效毛细管电泳分析 high performance capillary electrophoresis; 电压:0~30kV;
分离柱不涂敷任何固定液;
紫外或激光诱导荧光检测器;
(可检测到:10-19~10-21 mol/L);高效毛细管电泳的特点(书P144有6点);5.1.2 高效毛细管电泳(HPCE)基本原理;所以,迁移速度:;电渗现象与电渗流;2.HPCE中的电渗现象与电渗流;3.HPCE中电渗流的大小与方向;HPCE中电渗流的方向;4. HPCE中电渗流的流形;5. HPCE中电渗流的作用;HPCE中影响电渗流的因素 factors influenced electroosmosis;3. 电解质溶液性质的影响;第17页/共45页;4. 温度的影响;5. 添加剂的影响;HPCE中的参数与关系式 ;3.分离度 ;5.2 高效毛细管电泳仪;仪器流程与主要部件;1.高压电源;3.缓冲液池;毛细管电泳的进样方式; 毛细管一端插入样品瓶,加电压;;5.3 分离模式;一、毛细管区带电泳capillary zone electrophoresis ,CZE;二、毛细管凝胶电泳 capillary gel electrophoresis ,CGE; 1.缓冲溶液中加入离子型表面活性剂,其浓度达到临界浓度,形成一疏水内核、外部带负电的胶束。; 2. 电泳流和电渗流的方向相反,且ν电渗流 ν电泳 ,负电胶束以较慢的速度向负极移动;; 1. 根据等电点差别分离生物大分子的高分辨率电泳技术;
2. 毛细管内充有两性电解质(合成的具有不同等电点范围的脂肪族多胺基多羧酸混合物),当施加直流电压(6~8V)时,管内将建立一个由阳极到阴极逐步升高的pH梯度;
3. 氨基酸、蛋白质、多肽等的所带电荷与溶液pH有关,在酸性溶液中带正电荷,反之带负电荷。在其等电点时,呈电中性,淌度为零;; 4. 聚焦:具有不同等电点的生物试样在电场力的作用下迁移,分别到达满足其等电点pH的位置时,呈电中性,停止移动,形成窄溶质带而相互分离;;5.5 毛细管电泳的应用;阴离子分析;药物分析 analysis of pharmaceutics;采用MEKC模式,鉴定违禁药物;效果优于HPLG法;手性化合物分析;氨基酸与蛋白质分析;蛋白质分析;核酸分析及DNA排序 analysis of nucleic acids and sequence of DNA;新进展advances and special topics;Thank you!;感谢观看!
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