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(优选)蛋白质合成的生物学机制 现在是1页\一共有39页\编辑于星期五 氨基酸的活化 翻译的起始 肽链的延伸 肽链的终止 4.4蛋白质合成的生物学机制 现在是2页\一共有39页\编辑于星期五 (一)氨基酸的活化 氨基酸 + tRNA 氨基酰- tRNA ATP AMP+PPi 氨基酰-tRNA合成酶 现在是3页\一共有39页\编辑于星期五 氨基酰-tRNA合成酶对底物氨基酸和tRNA都有高度特异性。 氨基酰-tRNA合成酶具有校正活性(proofreading activity) 。 氨基酰-tRNA的表示方法: Ala-tRNAAla Ser-tRNASer Met-tRNAMet 现在是4页\一共有39页\编辑于星期五 原核生物中,起始氨基酸是: 起始AA-tRNA是: 真核生物中,起始氨基酸是: 起始AA-tRNA是: 甲酰甲硫氨酸 fMet-tRNAfMet 甲硫氨酸 Met-tRNAMet 现在是5页\一共有39页\编辑于星期五 第一步反应 氨基酸 +ATP-E —→ 氨基酰-AMP-E + AMP + PPi 现在是6页\一共有39页\编辑于星期五 第二步反应 氨基酰-AMP-E + tRNA 氨基酰-tRNA + AMP + E 现在是7页\一共有39页\编辑于星期五 tRNA与酶结合的模型 tRNA 氨基酰-tRNA合成酶 ATP 现在是8页\一共有39页\编辑于星期五 (二)翻译的起始 原核生物(细菌)为例: 所需成分: 30S小亚基、 50S大亚基、模板mRNA、 fMet-tRNAfMet、GTP、Mg2+ 翻译起始因子:IF-1、IF-2、IF-3、 现在是9页\一共有39页\编辑于星期五 (1) 起始因子(initiation factors, IF) 起始因子: 起始因子是参与蛋白质生物合成起始的可溶性蛋白因子 起始复合物: 蛋白质合成的起始,生成核糖体·mRNA·起始-tRNA三元复合物,也叫起始复合物。 起始复合物必须在起始因子帮助下才能形成。目前已知原核生物有3种起始因子,而真核生物约有10种。 现在是10页\一共有39页\编辑于星期五 原核生物的3种起始因子: ▼ IF-1 (9.5×103)为一小的碱性蛋白、已结晶、热稳定、没有专一的功能,只能增加其他两个起始因子的活性。 ▼ IF-2 (9.0×104~1.18×105, 有 IF-2a 和 IF-2b 两种形式) 热不稳定。IF-2的功能是通过生成IF-2·GTP·Met-tRNAfMet三元复合物,使起始tRNA与核糖体小亚基(30S亚基)结合。 ▼ IF-3 (有IF-3a、 IF-3b两种)是个双功能蛋白质,IF-3的功能是促进 mRNA与核糖体小亚基(30S亚基)结合,同时还具解离因子活性。 现在是11页\一共有39页\编辑于星期五 IF-3 IF-1 翻译起始(翻译起始复合物形成)又可被分成3步: 1. 30S小亚基首先与翻译起始因子IF-1,IF-3结合,在通过SD序列与mRNA模板相结合 A U G 5 3 现在是12页\一共有39页\编辑于星期五 S-D序列 现在是13页\一共有39页\编辑于星期五 IF-3 IF-1 IF-2 GTP 2.在IF-2和GTP的帮助下, fMet-tRNAfMet进入小亚基的P位,tRNA上的反密码子与mRNA上的起始密码子配对。 A U G 5 3 现在是14页\一共有39页\编辑于星期五 IF-3 IF-1 IF-2 GTP GDP Pi 3、带有tRNA、mRNA和3个翻译起始因子的小亚基复合物与50S大亚基结合,GTP水解,释放翻译起始因子。 A U G 5 3 现在是15页\一共有39页\编辑于星期五 IF-3 IF-1 A U G 5 3 IF-2 GTP IF-2 -GTP GDP Pi 现在是16页\一共有39页\编辑于星期五 真核生物翻译起始的特点 ●核糖体较大,为80S; ●起始因子比较多(约有10种); ● mRNA 5′端具有m7Gppp帽子结构 ● Met-tRNAMet ● mRNA的5′端帽子结构和3′端polyA都参与形成翻译起始复合物; 现在是17页\一共有39页\编辑于星期五 真核生物的起始因子对于生成80S核糖体·mRNA·Met-tRNAMet三元起始复合物是必要的。 现在是18页\一共有39页\编辑于星期五 表4-14a 真核细胞中参与翻译起始的蛋白质因子及其功能 真核因子 功能 eI
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