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微生物的生长与控制; §3. 影响微生物生长的主要因素;
●微生物生长特点
----平衡生长
----生长引起繁殖
----用群体指标反映(研究)生长;●生长的定义
Growth is defined as an increase in cellular constituents and may result in an increase in a microorganism’s size ,population number,
or both.
● 微生物数量和重量的增加。;§.1 测定生长繁殖的方法;二、测定生长繁殖的方法 ;(二)计繁殖数
1、直接法:
●血球计数板法
(常用)
●P-H计数板
●局限性
;2、间接法:(活菌计数法)
●平板计数法:菌落形成单位(cfu);●膜过滤培养法; §2、微生物的生长规律; ●同步培养方法;二、典型生长曲线(growth curve) ;●绘制曲线条件
1)分批培养
2)细胞数目的对数为纵坐标;●根据生长速率常数(R=n/t2-t1)划分:
1)延滞期:生长速率为零,仅个体变化
对策:
----采用对数期种子(种子的活化)
----增大接种量
----采用营养丰富培养基; ;●影响指数期代时长短的因素
1)菌种
2)营养成分
3)营养物浓度(生长限制因子存在与否);指数期M的应用
①作为代谢、生理研究的良好材料(生理特性较一致,细胞 成 分平衡发展,生长速率恒定)。
②增殖噬菌体的最适宿主菌龄。
③发酵生产中作为种子的最佳种龄。; 3.稳定期(最高生长期);; 4.衰亡期(decline phase);三、微生物的连续培养
连续生长:
在反应器中不断地流加新鲜培养液,同时不断排出发酵液,使培养物达到动态平衡,微生物长期保持在指数期的平衡生长状态和衡定的生长速率上,该生长方式称之为连续生长。
; ; 恒浊器;恒浊器
菌体浓度↑,浊度↑, 控制使流速↑;
菌体密度恒定;生长速率最快
恒化器
限制性营养物浓度恒定,流速恒定;
生长速率恒定;;●建议理解图表:;§3.影响微生物生长的主要因素
;●常见微生物培养温度
肠杆菌科:37°C
芽孢杆菌:30 °C
放线菌:28 °C
酵母菌:28 °C
土壤真菌:26-28 °C; ●菌种在不同生理过程存在不同的最适温度 ;二、氧气
1)专性好氧菌
只有在较高的氧浓度下才能生长的微生物。
2)兼性厌氧菌
???有氧生长为主,但也可在厌氧下生长的
微生物。
3)微好氧菌
仅在较低氧分压下才能生长的微生物。;
4)耐氧菌
可在有氧下进行发酵产能的微生物。
5)厌氧菌
仅能在厌氧条件下生长、分子态氧对其
有毒害作用的一类微生物。
;●5类微生物的判断试验(半固体琼脂柱);●厌氧菌的氧毒害机制
----自由基 理论:
生物体内存在着超氧阴离子等自由基,化学性质非常活泼,反应力极强,可对细胞内各种生物活性的大分子和细胞膜产生破坏作用,引起细胞的死亡。;;●5类微生物的氧化酶系
类型 产能 SOD 过氧化氢酶 过氧化物酶
好氧菌 呼吸 ++ + + ---
兼性 呼吸、发酵 ++ + + ---
微好氧 呼吸 + + ---
耐氧 发酵 ++ --- + +
厌氧 发酵、 -- --- ---
无氧等
; 三、pH;因此,发酵生产上对pH的控制很重要。
; ●引起pH值改变的原因:;§3.微生物培养方法
一、好气菌的培养
1)实验室常用培养方法及用途
----试管斜面(固)
----琼脂平板(固)
----摇瓶培养 (液);2)生产常用培养方法及用途
----曲法培养(固)
----浅盘培养 (液)
----深层液体通气培养;二、厌氧菌的培养 1)厌氧罐; GasPak 产气袋工作原理;2)厌氧手套箱;§5.有害微生物的控制
一、概念
灭菌
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