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刺激强度、刺激频率与骨骼肌收缩的关系Effect of Stimulation with Different Intensities and Frequencies on Muscular Contraction第1页,共23页。【目的要求】掌握蟾蜍在体坐骨神经-腓肠肌标本的制备方法;学习神经—肌肉实验的电刺激方法;观察不同强度和频率的刺激对肌肉收缩的影响。第2页,共23页。【实验原理】神经纤维具有兴奋性和传导性;肌肉组织具有兴奋性与收缩性,肌肉收缩是其兴奋的外在表现。第3页,共23页。刺激量刺激强度刺激持续时间刺激强度/时间变化率刺激和兴奋刺激stimulation:指细胞所处环境因素的变化。刺激要能使细胞发生兴奋,就必须达到一定的刺激量。第4页,共23页。阈刺激阈上刺激阈下刺激<<有效刺激1. 刺激强度与肌肉收缩反应阈强度能引起组织发生反应的最小刺激强度,又称为阈值。具有阈强度的刺激称为阈刺激(threshold stimulus)。第5页,共23页。一条骨骼肌纤维达到阈值→肌纤维收缩超过阈值→收缩力不增加“全或无” (all-or-none)阈下刺激→无兴奋收缩阈刺激→少数兴奋性最高的肌纤维产生收缩刺激强度↑→ 肌纤维被兴奋数量↑,肌肉收缩力↑最适强度→所有的肌纤维均兴奋,肌肉收缩最大>最适强度 → 收缩力不增加一块骨骼肌一定范围内,肌肉收缩力的大小与刺激强度成正比第6页,共23页。2.刺激频率与肌肉收缩反应单收缩twitch:骨骼肌受到一次短促有效刺激时,可发生一次动作电位,随后出现一次收缩和舒张。第7页,共23页。动作电位时程(相当于绝对不应期)仅1~2毫秒收缩过程可达几十~几百毫秒骨骼肌可在机械收缩过程中接受新刺激发生新的兴奋和收缩第8页,共23页。两个阈上刺激,相继作用于神经-肌肉标本,如果刺激间隔大于单收缩的时程,肌肉则出现两个分离的单收缩;第9页,共23页。较高频率连续刺激作用于标本时,出现多个收缩反应的融合,新收缩过程与上次尚未结束的收缩过程发生总和,称为强直收缩tetanus (复合收缩)。后一收缩发生在前一收缩的舒张期时,称为不完全强直收缩inplete tetanus 。后一收缩发生在前一收缩的收缩期时,各自的收缩完全融合,肌肉处于持续的收缩状态,称为完全强直收缩plete tetanus 。第10页,共23页。第11页,共23页。第12页,共23页。在生理条件下,支配骨骼肌的传出神经总是发出连续的冲动,所以骨骼肌的收缩都是强直收缩;静息状态下,中枢神经也经常发放低频率神经冲动至骨骼肌,产生一定程度的强直收缩,称为肌紧张(muscle tone)。第13页,共23页。【动物和器材】蟾蜍或蛙;任氏液;常规手术器械;微机生物信号采集处理系统毁髓针、锌铜弓、解剖盘、玻璃分针、培养皿、烧杯、滴管、蛙板、蛙钉等。第14页,共23页。【方法和步骤】1. 蟾蜍在体坐骨神经-腓肠肌标本制备2. 实验装置连接3. 实验观察1)刺激强度对骨骼肌收缩的影响2)刺激频率对骨骼肌收缩的影响第15页,共23页。1. 蟾蜍在体坐骨神经-腓肠肌标本制备 双毁髓,剥去一侧下肢自大腿跟部起的全部皮肤,将标本俯卧位固定于蛙板上。分离坐骨神经:在大腿内侧的股二头肌与半膜肌之间,纵向分离坐骨神经至膝关节处,并在神经下穿线备用。游离腓肠肌:将腓肠肌分离至膝关节。在膝关节旁钉一大头针,折弯压住膝关节。第16页,共23页。2. 实验装置连接将腓肠肌跟腱的结扎线固定在张力换能器的悬臂梁上(不宜太紧,线与桌面垂直)。把穿好线的坐骨神经轻轻提起,放在刺激电极上,保证神经与刺激电极接触良好。换能器的输出端与生物信号采集处理系统的输入通道相连。启动生物信号采集系统软件,选择好通道和采样参数设置,启动记录按钮,开始记录。第17页,共23页。3. 实验观察(1)刺激强度对骨骼肌收缩的影响使用单刺激或自动强度调节方式,波宽为1ms,刺激强度从零开始逐渐增大,找出刚能引起肌肉出现微小收缩的刺激强度(阈强度)。继续增强刺激强度,观察肌肉收缩反应是否也相应增大。继续增强刺激强度,直至肌肉收缩曲线不能继续升高为止。找出刚能引起肌肉出现最大收缩的最小的刺激强度,即最大刺激强度。第18页,共23页。(2)刺激频率对骨骼肌收缩的影响 用最大刺激强度的连续刺激,选择经典方式逐渐增加刺激频率,分别记录不同频率时的肌肉收缩曲线,观察不同频率时的肌肉收缩变化。第19页,共23页。实验结果?实验次数刺激强度/mV收缩幅度/mm???第20页,共23页。【注意事项】1.经常用任氏液浸润标本,保持生理活性。 2. 肌槽两电极之间不要残留液体,防止电极间短路。3. 每次刺激后须让肌肉休息30s以上 ,连续刺激不可超过5秒,以免标本疲劳。4. 找准最适刺激强度,以防刺激过强而损伤神经. 5. 换
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