测定活菌数和生长量.pptx

水处理微生物测定活菌数和生长量余永昌 讲师知识点测定活菌数和生长量主要内容1 活菌数测定法2 测定微生物生长量 测定活菌数和生长量1 活菌数测定法1.1 平板菌落计数法1.2 液体稀释测定法1.3 膜过滤计数法测定活菌数和生长量1.1 平板活菌计数法a.涂布平板法 使用较多的常规方法，但有时涂布不均匀！b.稀释倒平板法 操作较麻烦，对好氧菌、热敏感菌效果不好！测定活菌数和生长量1.2 液体稀释测定法 测定不占优势，但具有某种特殊生理功能的类群。X 5X 5X 5X 5 稀释度 10-3 10-4 10-5 10-6 10-7 10-8 重复数 55 5 5 5 5 出现生长的管数 55 5 3????? 1???? 0测定活菌数和生长量硝酸纤维素膜1.3 膜过滤计数法测定空气、水等含菌量低的样品当中的活菌数测定活菌数和生长量2 测定微生物生长量2.1 重量测定法2.2 细胞组分含量测定法2.3 菌丝长度测定法2.4 生理指标测定法测定活菌数和生长量2.1 重量测定法 将一定体积样品中的菌体通过离心或过滤的方法分离出来，用水洗净附在细胞表面的残留培养基，再次离心后直接称重，即为湿重。 若将湿重样品在105℃烘干或真空下干燥至恒重，即为干重。微生物的干重一般为其湿重的10%～20%。干重法直接而又可靠，但要求被测菌体浓度较高，样品中不含或少含不溶性杂质。测定活菌数和生长量2.2 细胞组分含量测定法 2.2.1 蛋白质含量测定法 蛋白质是微生物细胞的主要成分，含量也比较稳定，蛋白质含量可反映微生物的生长量。氮是蛋白质的重要组成元素，从一定体积的样品中分离细胞，洗涤后，用凯氏定氮法或双缩脲法测出含氮量。蛋白质含氮量为16％，因此，总含氮量与细胞蛋白质总量的关系可按下式计算： 蛋白质总量＝含氮量×6.25测定活菌数和生长量2.2 细胞组分含量测定法 2.2.2 DNA含量测定法 DNA是微生物的重要遗传物质，其含量较为恒定，不易受菌龄和环境因素的影响。该方法是基于DNA与3，5-二氨基苯甲酸-盐酸结合能显示特殊荧光的原理，定量测定菌悬液中的荧光强度，求得DNA含量。每个细菌细胞DNA平均含量为8.4×10-11mg，可根据DNA含量计算出细菌的数量。测定活菌数和生长量2.3 菌丝长度测定法 丝状微生物的生长可用一定时间内其菌丝的生长长度来表示。 测定方法是将丝状真菌接种到固体培养基上，定时测定菌丝伸展的长度或面积。对于生长快的菌类每24h测定1次，对于生长慢的菌类可数天测定1次。该法的缺点是不能反映菌丝的纵向生长，即菌落的厚度和生长到培养基内部的菌丝生长，并且接种量也会影响测定结果。测定活菌数和生长量2.4 生理指标测定法 通过测定细胞的生理指标来测定微生物生长量，与微生物生长量相平行的生理指标有耗氧量、呼吸强度、酶活性、生物热等。根据微生物在生长过程中伴随出现的这些指标，样品中微生物数量多或生长旺盛，这些指标愈明显，因此可以借助特定的仪器，如瓦勃氏呼吸仪、微量量热计等设备来测定相应的指标。测定活菌数和生长量小结 1)活菌数测定法：平板菌落计数法，液体稀释测定 法， 膜过滤计数法； 2)测定微生物生长量：重量测定法，细胞组分含量 测定法，菌丝长度测定法，生理指标测定法。谢谢！