河南农业大学考研专业课《现代分子生物学》考试试卷(893).pdfVIP

河南农业大学考研专业课《现代分子生物 学》 课程试卷（含答案） __________学年第___学期 考试类型：（闭卷）考试 考试时间 ： 90 分钟 年级专业_____________ 学号_____________ 姓名_____________ 1、分析题（5 分，每题 5 分） 1. 写出从组织中抽取RNA 的关键步骤，并解释如何判断RNA质量。 答案： （1 ）从组织中提取RNA 的步骤如下： ①将组织在冰水中磨碎，每 50 ～100mg 组织加入 1ml TRIzol 裂解液溶解样品，充分吹打混匀 ②每 1ml TRIzol 加入 2.0ml 氯仿，剧烈震荡 15s ，室温放置 5min ③4℃，10000g 离心 15min ，此时RNA 典型集中在水相中 ④将水相转移至新的离心管中，加入等大小异丙醇，室温放置 10min ⑤4℃，10000g 离心 10min ，此时可在离心管拐点观察到白色 沉淀，即为 RNA ⑥用 75 冷的乙醇洗涤沉淀，4℃，7500g 以下，离心 5min ，弃 上清。 ⑦超净台中吹干，加入无RNase的水溶解。 （2）检测RNA质量的方法如下： ①凝胶成像：取适量RNA水溶液加入电泳缓冲液后，跑琼脂糖质 谱，如果28S和18S条带明亮、清晰，并且28S的亮度在18S条带 的两倍以上，则认为RNA的质量是好的。 ②吸光度检测：使用紫外分光光度计检测RNA样品在260nm、 280nm处的吸光度，若两者的比值在1.8～2.0时，可认为RNA纯 度良好，蛋白质等其他物质的污染可以污染环境接受。 解析： 2、判断题（55分，每题5分） 1. 荧光原位杂交（FISH）可以把同一个基因定位到特定的染色体位 置上去。（ ） 答案：正确 解析：荧光原位杂交是20世纪80年代末在放射性原位杂交技术基础 上发展起来的一种非放射性分子生物学和细胞遗传学结合的新技术， 是以荧光标记取代同位素标记而形成的一种新的原位杂交方法，可以 把同一个基因定位到特定的染色体位置上去。 2. 原核生物强终止子结构为富含GC碱基的发夹＋polyU链，若 polyU突变为polyC，则转录终止效率提高。（ ） 答案：错误 解析：核酸生物强终止子结构为富含GC碱基的发夹＋polyA链，若 polyA突变为polyC，则转录终止稳定性明显降低。 3. 蛋白质在小于等电点的 pH 溶液中，向阳极移动，而在大于等电 点的 pH 溶液中，将向阴极移动。（ ） 答案：错误 解析：蛋白质在小于等电点的 pH 溶液中带正电，电泳时向阴极垂直； 在大于等电点的pH溶液中带负电，电泳时向金属表面移动。 4. 同一种真核mRNA 前体，由于在不用细胞或组织中的差异剪辑， 可以表达出多种氨基酸序列、长度及糖基化程度不同的多肽。（ ） 答案：错误 解析：糖基化程度差异与差异剪辑不相关。 5. DNA 克隆较之基因组克隆最重要的优越性就是它们含有一个基因 的完整序列。（ ） 答案：错误 解析：基因组克隆与DNA克隆相比，基因组克隆最重要优越性的是它 们含有一个基因的完整序列。 6. 乳糖操纵子在非诱导状态不存在本底合成。（ ） 答案：错误 解析：乳糖操纵子的本底水平表达是指在非诱导状态下有少量的lac mRNA化学合成来指导透过酶的合成，每个细胞周期发生1～2次。 7. 许多蛋白质的三维结构是由其分子伴侣决定的。（ ） 答案：错误 解析： 8. 单链 DNA 结合蛋白与 DNA 结合使其解链。（ ） 答案：错误 解析：复制叉上的单链结合蛋白的作用是通过覆盖打开双螺旋的DNA 单链，避免链内碱基配对。