基因工程的基本操作程序（第三课时）【核心知识精研精讲】 高二生物 （人教版2019选择性必修3）.pptxVIP

03第三步：将目的基因导入受体细胞三第三步：将目的基因导入受体细胞受体细胞类型植物细胞动物细胞微生物细胞花粉管通道法我国科学家独创显微注射法Ca2+处理法农杆菌转化法常用三第三步：将目的基因导入受体细胞（我国科学家独创）花粉管通道法植物细胞方法一：用微量注射器将含目的基因的DNA 溶液直接注入子房中含目的基因的DNA 溶液三第三步：将目的基因导入受体细胞（我国科学家独创）花粉管通道法植物细胞方法二：在植物受粉后的一定时间内，剪去柱头，将DNA溶液滴加在花柱切面上，使目的基因借助花粉管通道进入胚囊。三第三步：将目的基因导入受体细胞花粉管通道法农杆菌转化法 转化：目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。实质是基因重组。植物细胞农杆菌是一种在土壤中生活的微生物，能在自然条件下侵染双子叶植物和裸子植物，而对大多数单子叶植物没有侵染能力。农杆菌三第三步：将目的基因导入受体细胞（可转移的DNA）T-DNA花粉管通道法农杆菌转化法Ti质粒植物细胞农杆菌农杆菌是一种在土壤中生活的微生物，能在自然条件下侵染双子叶植物和裸子植物，而对大多数单子叶植物没有侵染能力。 转化：目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。实质是基因重组。三第三步：将目的基因导入受体细胞（可转移的DNA）T-DNA农杆菌转化法Ti质粒目的基因含重组 Ti 质粒的农杆菌构建表达载体农杆菌转入农杆菌含目的基因的重组 Ti 质粒三第三步：将目的基因导入受体细胞（可转移的DNA）T-DNA将目的基因插入染色体 DNA 中农杆菌转化法目的基因Ti质粒含重组 Ti 质粒的农杆菌农杆菌构建表达载体转入农杆菌导入植物细胞含目的基因的重组 Ti 质粒三第三步：将目的基因导入受体细胞（可转移的DNA）T-DNA将目的基因插入染色体 DNA 中农杆菌转化法目的基因Ti质粒表现出新性状的植株含重组 Ti 质粒的农杆菌农杆菌构建表达载体转入农杆菌导入植物细胞含目的基因的重组 Ti 质粒两次导入：第一次导入是将含目的基因的Ti质粒重新导入农杆菌；第二次导入(非人工操作)是指含目的基因的T-DNA导入受体细胞（非人工操作）。 三第三步：将目的基因导入受体细胞该过程涉及两次拼接和两次导入，你能总结吗？（可转移的DNA）T-DNA将目的基因插入染色体 DNA 中第一次拼接农杆菌转化法Ti质粒第二次拼接两次拼接：第一次拼接是将目的基因拼接到Ti质粒的T-DNA上；第二次拼接(非人工操作)指被插入目的基因的T-DNA拼接到受体细胞染色体的DNA上。目的基因第一次导入含重组 Ti 质粒的农杆菌第二次导入构建表达载体农杆菌转入农杆菌导入植物细胞含目的基因的重组 Ti 质粒三第三步：将目的基因导入受体细胞根据受体植物的不同，所用的具体转化方法有所区别。方法一：可以将新鲜的从叶片上取下的圆形小片与农杆菌共培养，然后筛选转化细胞，并再生成植株；受体细胞为体细胞（利用植物细胞的全能性）方法二：将花序直接浸没在含有农杆菌的溶液中一段时间，然后培养植株并获得种子，再进行筛选、鉴定等。随着转化方法的突破，用农杆菌侵染水稻、玉米等多种单子叶植物也取得了成功。受体细胞为受精卵三第三步：将目的基因导入受体细胞农杆菌转化法小结表达载体植物细胞农杆菌目的基因构建转入导入插入表达植物细胞染色体DNA新性状植株Ti质粒三第三步：将目的基因导入受体细胞受体细胞类型植物细胞动物细胞微生物细胞花粉管通道法我国科学家独创显微注射法Ca2+处理法农杆菌转化法常用三第三步：将目的基因导入受体细胞受体细胞类型植物细胞动物细胞微生物细胞花粉管通道法我国科学家独创显微注射法Ca2+处理法农杆菌转化法常用三第三步：将目的基因导入受体细胞显微注射法将目的基因导入动物受精卵最常用的一种方法是利用显微注射将目的基因注入动物的受精卵中，这个受精卵将发育成为具有新性状的动物。动物细胞三第三步：将目的基因导入受体细胞①体积大，易操作。②全能性高，易培养成完整个体。显微注射法将目的基因导入动物受精卵最常用的一种方法是利用显微注射将目的基因注入动物的受精卵中，这个受精卵将发育成为具有新性状的动物。受精卵注射器构建基因表达载体并提纯利用显微注射将基因表达载体注入动物的受精卵中动物细胞早期胚胎培养胚胎移植固定吸管获得具有新性状的动物显微注射仪三第三步：将目的基因导入受体细胞受体细胞类型植物细胞动物细胞微生物细胞花粉管通道法我国科学家独创显微注射法Ca2+处理法农杆菌转化法常用三第三步：将目的基因导入受体细胞受体细胞类型植物细胞动物细胞微生物细胞花粉管通道法我国科学家独创显微注射法Ca2+处理法农杆菌转化法常用三第三步：将目的基因导入受体细胞Ca2+处理法在基因工程操作中，常用原核生物作为受体细胞，其中以大肠杆菌应用最为广泛。研究人员一般先用