生物敏感元件的固定化.pptxVIP

生物敏感元件的固定化第1页/共14页 第三章 生物敏感元件的固定化3.2 基本方法第2页/共14页 第三章 生物敏感元件的固定化3.2 基本方法（1）夹心法：简单，固定量大第3页/共14页 第三章 生物敏感元件的固定化3.2 基本方法（2）吸附：依据带电的酶或细胞和载体之间的静电作用，使酶吸附于惰性固体的表面或离子交换剂上。优点：条件温和，操作简便，酶活力损失少。缺点：结合力弱，易解吸附。第4页/共14页 第三章 生物敏感元件的固定化3.2 基本方法（3）包埋：多样，失活小，影响因素多 将酶用物理的方法包埋在各种载体（高聚物）内。分为：网格型：将酶包埋在高分子凝胶细微网格中。微囊型：将酶包埋在高分子半透膜中。第5页/共14页 第三章 生物敏感元件的固定化包埋法是目前应用最多的一种较理想的方法，与其它固定化方法相比：优点：不与酶蛋白氨基酸残基反应，很少改变酶的高级结构，酶活回收率高。缺点：只适合作用于小分子底物的酶。第6页/共14页 第三章 生物敏感元件的固定化3.2 基本方法（4）共价键结合 ：借助共价键将酶的活性非必需侧链基团和载体的功能基团进行偶联。偶联成功与否取决于： 载体：功能基团：芳香氨基，羧基，羧甲基等。酶分子:侧链非必需基团：羧基，巯基，羟基，酚基，咪唑基。第7页/共14页 第三章 生物敏感元件的固定化优点：酶与载体结合牢固，不会轻易脱落，可连续使用。缺点：反应条件较激烈，易影响酶的空间构象而影响酶的催化活性。第8页/共14页 第三章 生物敏感元件的固定化3.2 基本方法（5）交联固定： 借助双功能试剂使酶分子之间发生交联的固定化方法。双功能试剂： 常用的是戊二醛 戊二醛有两个醛基，均可与酶或蛋白质的游离氨基反应,使酶蛋白交联。第9页/共14页 第三章 生物敏感元件的固定化3.2 基本方法 缺点：(1)反应条件激烈，酶分子的多个基团被交联，酶活力损失大。(2)制备的固定化酶颗粒较小，给使用带来不便。第10页/共14页 第三章 生物敏感元件的固定化3.2 基本方法（6）微胶囊法：脂质体第11页/共14页 第三章 生物敏感元件的固定化3.3 LB膜技术LB膜基本原理LB膜制备酶膜优点：3.4 光平板印刷技术第12页/共14页 第三章 生物敏感元件的固定化3.5 固定化生物活性材料的性质固定化酶的稳定性：1）2）3）固定化酶的动力学常数1)固相载体上的静电场影响带电荷的底物分布2）底物扩散影响酶促反应的速度第13页/共14页 感谢观看！第14页/共14页